Загородня С. Д. Розробка специфічних компонентів імуноферментної тест-системи для визначення антитіл до вірусу Епштейна-Барр та характеристика її параметрів

Дисертація присвячена розробці імуноферментної тест-системи для виявлення антитіл до вірусу Епштейна-Барр. Одержаний антиген для сенсибілізації планшет, який містить кілька білків (EBNA, EA, VCA) вірусу Епштейна-Барр та підтверджена його специфічність. Оптимізовані умови проведення всіх етапів імуноферментного аналізу, склад детектуючих компонентів та буферних розчинів. До специфічного антигену та очищеного вірусу одержані гіперімунні поліклональні сироватки кроля та охарактеризована їх активність. Створені панелі позитивних та негативних сироваток, що гарантовано містять або не містять антитіла до ВЕБ відповідно, які надалі використовувались як стандарти при конструюванні тест-системи та визначенні критеріїв оцінки результатів. Показано, що специфічність тест-системи "ІФА-АтВЕБ-стрип" становить 100%, а чутливість - 96%. З використанням тест-системи та конкурентного ІФА досліджений рівень антигенної спорідненості ВЕБ з деякими представниками родини герпесвірусів як один з критеріїв її специфічності.Цейпоказник досить низький і становить 2,4%, 4,1% та 2,2% відповідно для ВЕБ та вірусу герпесу звичайного 1-го типу, ВЕБ та цитомегаловірусу, ВЕБ та вірусу оперізуючого лишаю. Були досліджені понад 2000 сироваток різних груп населення м. Києва (донорів, здорових вагітних жінок, хворих на інфекційний мононуклеоз, лімфоми, туберкульоз) та 45 виробничих серій "Імуноглобуліну людини нормального". В них визначені високі рівні антитіл до ВЕБ, що свідчить про значну напруженість специфічного імунітету та широку циркуляцію цього вірусу. В результаті проведених досліджень вперше в Україні розроблена твердофазна імуноферментна тест-систему, яка дозволяє виявляти антитіла (IgG та IgM) проти вірусу Епштейна-Барр в сироватках крові людини та проводити диференційну діагностику захворювань, спричинених ВЕБ. Ключові слова: вірус Епштейна-Барр, антитіла, імуноферментний аналіз, тест-система і її специфічність, чутливість.