Кондакова Л. В. Іммобілізована на кремнеземах галактозооксидаза: одержання, властивості, застосування

Дисертаційну роботу присвячено розробці методик одержання активних і стабільних препаратів галактозооксидази, іммобілізованої на вихідному кремнеземі та аміноорганокремнеземах, активованих 2,4 толуіленідіізоціанатом, хлористим ціануром та 2,4 галактогексодіальдозою, і вивченню властивостей гетерогенних каталізаторів з метою використання для аналізу галактозовмісних вуглеводів. Обгрунтовано спосіб одержання активних і стабільних препаратів галактозооксидази, адсорбованої на вихідному кремнеземі. При певних співвідношеннях ферменту і носія одержані таким методом препарати мають активність, яка суттєво (~ у 20 разів)перевищує активність нативного біокаталізатору. Запропоновано одностадійний спосіб одержання препаратів галактозооксидази, ковалентно зв'язаних через аміногрупи поверхні за рахунок продукту ферментативного окиснення галактози (2,4-галактогексодіальдози). Одержані цим способом препарати мають активність більш високу у порівнянні із ферментом, закріпленим на активованих кремнеземних матрицях. Визначено оптимальні концентрації ефекторів, при яких іммобілізований та розчинний фермент мають максимальну активність і стабільність. Показано, що максимальна активність гетерогенного біокаталізатора спостерігається при неперервному прокачуванні через проточний реактор буферного розчину, що містить CuCl2 і Na-ЕДТА, і імпульсному введенні розчину субстрату, в який додано ферріціанід калію. Розроблено проточно-інжекційну систему, що включає реактор з іммобілізованою галактозооксидазою та проточний електрод Кларка, для аналізу субстратів ферменту. Показано можливість використання іммобілізованої галактозооксидази для визначення галактозовмісних вуглеводів в складних сумішах (молочних продуктах дитячого харчування і продуктах цукрового виробництва) та в тонкому органічному синтезі (одержання гліцеринового альдегіду). Ключові слова: галактозооксидаза, кремнезем, аміноорганокремнезем, іммобілізація, гетерогенний біокаталізатор, галактозовмісні вуглеводи, електрод Кларка, проточно інжекційна система.