Паливода К. О. Модуляція шляхів апоптозу за участі фулеренів С60 у нормальних та трансформованих Т-лімфоцитах

Дисертацію присвячено порівняльному дослідженню чутливості до дії цитотоксичних чинників (пероксиду водню, цитозинарабінозиду, стауроспорину), протекторного ефекту фулеренів С60 та біохімічних показників апоптозу за дії фотозбуджених фулеренів С60 у нормальних (тимоцити щура лінії Wistar) і трансформованих (лейкемічні Т-лімфоцити людини лінії Jurkat) Т-клітинах. Показано, що за дії цитотоксичних чинників значно раніше відбувається зниження життєздатності тимоцитів та активація каспази-3 порівняно з клітинами Jurkat. Преінкубація з фулеренами С60 (100 мкМ) запобігає спричиненому чинниками зниженню життєздатності тимоцитів, тоді як у клітинах Jurkat протективного ефекту фулеренів С60 не виявлено. Протективна дія фулеренів С60 на тимоцити за дії пероксиду водню може бути опосередкована впливом на фосфорилювання протеїнів за залишками тирозину - преінкубація з С60 призводить до часткового відновлення зниженого за дії Н2О2 рівня фосфорилювання протеїнів 20, 72 та 100 кДа. Встановлено, що комбінована дія фулеренів С60 та УФ-видимого опромінення (320-600 нм) не впливає на життєздатність тимоцитів, але призводить до зниження життєздатності клітин Jurkat. Продемонстровано залежність фототоксичного впливу фулеренів С60 на трансформовані Т-клітини від часу опромінення та від концентрації С60. Доведено, що загибель клітин Jurkat за дії фотозбуджених фулеренів С60 відбувається шляхом апоптозу, про що свідчить активація каспази-3 та посилення фрагментації ДНК з накопиченням фрагментів 200 та 400 п.о. Доведено активацію мітохондріального шляху індукції апоптозу клітин Jurkat за дії фотозбуджених фулеренів С60 - виявлено появу цитохрому с у цитозолі у період (1-3 год), що передує активації каспази-3. Встановлено підвищення активності супероксиддисмутази у ранній термін після опромінення клітин Jurkat, преінкубованих з фулеренами С60, що є показником продукції АФК всередині клітини. Виявлена специфічність апоптогенного ефекту фотозбуджених фулеренів С60 у пухлинних Т-клітинах вказує на перспективність використання С60 як фотосенсибілізаторів для розробки методів фотодинамічної терапії.