Гребіник С. М. Продукування активних форм кисню та зміна рівня цитозольного кальцію у трансформованих Т-клітинах за дії фотозбудженого фулерену С60

Дисертацію присвячено дослідженню продукування активних форм кисню (АФК) та показників кальцієвого гомеостазу у клітинах з нормальним (тимоцити щура лінії Вістар) та трансформованим (лейкемічні клітини ліній МТ-4, L1210, Jurkat) геномом за дії представника вуглецевих наноструктур фулерена С60 та за умови його фотозбудження. Виявлено відмінності у мембранотропних ефектах фулерену С60 у клітинах досліджуваних типів. У тимоцитах фулерен С60 (5*10-5 М) пригнічував активність екто-АТРази у плазматичній мембрані і не впливав на Са2+ -проникність мембрани ЕПР, тоді як у клітинах МТ-4 не впливав екто-АТРазну активність, але посилював вихід Са2+ з ЕПР. Ефекти фотозбудженого фулерена С60 було оцінено у клітинах, преінкубованих упродовж 1год з 10-5М С60 та опромінених у діапазоні 320-600 нм. Виявлено зниження життєздатності лейкемічних клітин L1210 та Jurkat, з використанням флуоресцентних зондів DCF та індо-1 продемонстровано інтенсифікацію продукування АФК та тривале підвищення концентрації цитозольного Са2+ у динаміці після фотозбудження фулерена С60. У тимоцитах таких ефектів виявлено не було. Показано, що система підтримання кальцієвого гомеостазу у лейкемічних клітинах L1210 та Jurkat є ремодульованою ? відносна величина Са2+-пулу ендоплазматичного ретикулума є меншою, а вхід Са2+ катіона через плазматичну мембрану у ЕПР за ємнісним механізмом ? слабкішим, ніж у тимоцитах. За дії фотозбудженого фулерену С60 ємнісний вхіду Са2+ у клітини L1210 та Jurkat значно посилюється, мітохондрії втрачають здатність утримувати Са2+, акумульований внаслідок його виходу з ЕПР, що призводить до неконтрольованого виходу катіона з мітохондрій у цитозоль та до дисипації мембранного потенціалу мітохондрій, виміряного за допомогою зонду TRME. Отримані данні вказують на перспективність використання фотозбудженого фулерену С60 для впливу на систему Са2+-сигналінгу та активації шляхів Са2+-залежного апоптозу в лейкемічних клітинах.