Подуфалий В. В. Цитоморфологічні та функціональні характеристики кріоконсервованих сперміїв при патології сперматогенезу.

Об'єкт дослідження - процеси функціональної активності, морфологічної цілісності, перекисного окислення ліпідів, фрагментації ДНК, апоптозу і некрозу нативних та кріоконсервованих сперматозоїдів людини при олігоастенотератозооспермії та азооспермії. Метою роботи є вивчення морфофункціональних характеристик кріоконсервованих сперматозоїдів, отриманих у пацієнтів з олігоастенотератозооспермією та азооспермією, впливу цих характеристик на ранній ембріогенез і частоту настання вагітності при лікуванні безпліддя методами допоміжних репродуктивних технологій. Методи дослідження: культуральні, цитологічні, морфометричні, світлова мікроскопія, кріоконсервування (програмне заморожування), статистичні. Результати. У роботі виявлено, що в процесі кріоконсервування при олігоастенотеразооспермії відбувається накопичення сперміїв із патологією будови голівки. Підвищений рівень продуктів ПОЛ-МДА свідчить про наявність окисного стресу в сперматозоїдах чоловіків із олігоастенотератозооспермією. Після кріоконсервування та накопичення сперміїв для наступного запліднення ооцитів in vitro він досягає максимальних значень. Встановлено, що рівень фрагментації ДНК, апоптозу та некрозу в еякуляторних сперматозоїдах істотно вищий, ніж у тестикулярних. Дані висновки можуть бути використані при формуванні стратегії подолання чоловічого фактора безпліддя подружніх пар. У зв'язку з цим запропоновано новий підхід до тактики лікування подружніх пар із патологією сперматогенезу - вибір одиничних морфологічно нормальних сперміїв та їх введення у цитоплазму ооцита. Новизна. Вперше системно досліджено морфофункціональні характеристики кріоконсервованих сперміїв людини, виділених із еякулятів чоловіків, які мали важкі порушення сперматогенезу, а саме - при олігоастенотератозооспермії та біопсії яєчка у пацієнтів із азооспермією. Вперше виявлено, що в процесі кріоконсервування відбувається накопичення сперміїв із патологією голівки, що вимагає додаткової селекції кріоконсервованих сперміїв за морфологічними критеріями. Підвищення рівня перекисного окислення ліпідів, апоптозу та некрозу, фрагментації ДНК у сперміях людини після кріоконсервування вказують на необхідність застосування технології інтрацитоплазматичної ін'єкції морфологічно відібраного спермія для попередження можливого аномального запліднення.