Геращенко О. Л. Протипухлинна активність рекомбінантних бета-дефенсинів людини на моделі in cellulo

Дисертація присвячена дослідженню протипухлинної активності рекомбінантних бета-дефенсинів людини (рек-hBDs) 2-4 на моделі in cellulo. Шляхом прокаріотичної експресії отримано продуценти рек-hBD-2-4 людини; розроблено методики очистки біологічно активних рек-hBDs. Встановлено, що рек-hBD-2 здатен у концентраційно-залежний спосіб у наномолярному діапазоні концентрацій пригнічувати проліферацію, життєздатність клітин, здатність до субстрат незалежного росту та міграційну активність пухлинних клітин людини різного гістогенезу. Показано, що дія рек-hBD-2 призводить до блокування клітинного циклу у точці звірки G1/S, значного дефосфорилювання pRB та зниження рівня циклінів D1 та E, CDK4, B-Raf та підвищення рівня p21WAF1. Продемонстровано, що рек-hBD-2 може впливати на експресію генів віментину та Е-кадгерину в залежності від гістологічного типу пухлинних клітин. Встановлено, що рек-hBD-3 не має ріст-супресувального впливу на культивовані пухлинні клітини, але може підсилювати цитотоксичні ефекти доцетакселу та вінкрістину in cellulo. Аналіз біологічної активності рек-hBD-4 людини продемонстрував, що в концентрації 1-100 нМ рек-hBD-4 стимулює прогресію клітин в точці звірки G2/M, підсилює експресію протоонкогену B-Raf, колоніє-формуючу здатність пухлинних клітин та їх міграційну активність, але при вищих концентраціях (>500 нМ) пригнічує експресію B-Raf, блокує клітинний цикл у точці звірки G1/S, пригнічує міграційну здатність пухлинних клітин та їх здатність до колонієутворення у напіврідкому середовищі. Дослідження щодо комбінованих ефектів рек-hBD-2, -3 та -4 на ріст пухлинних клітин в культурі показали, що індуцибельні бета-дефенсини людини здатні підсилювати або послаблювати впливи один одного на життєздатність культивованих пухлинних клітин.