Коломієць О. В. Трансмембранний обмін Са2+ в мітохондріях міометрія за дії оксиду азоту та калікс[4]аренів

Об'єкт: гладеньком'язові клітини матки та ізольовані мітохондрії міометрія. Мета: вивчити трансмембранний обмін Са2+ в мітохондріях міометрія щурів та поляризацію їхньої мембрани за дії оксиду азоту та калікс[4]аренів. Методи: препаративної біохімії, спектрофотометрії, спектрофлюориметрії, протокової цитофлюориметрії, фотонної кореляційної спектроскопії, світлової, електронної та лазерної конфокальної мікроскопії, кінетичного та статистичного аналізу. Доведено, що Са2+-чутливий флюоресцентний зонд Fluo 4-AM можна використовувати для вивчення закономірностей обміну Са2+ в мітохондріях міометрія. Показано, що оксид азоту утворюється і посилює енергозалежну акумуляцію іонів Са в мітохондріях міометрія. Стимулюючий ефект опосередкований активацією Са2+-уніпортера та не залежить від функціонування пори перехідної провідності. Досліджено властивості Са2+/Н+-обміну у внутрішній мембрані мітохондрій міометрія, зокрема, встановлено, що він здійснюється з стехіометрією 1:1 та функціонує за фізіологічних значень рН. Виявлено, що Са2+/Н+-обмін є нечутливим до дії оксиду азоту, але стимулюється калікс[4]аренами С-97, С-99 та амілоридом і пригнічується іонами Mg. Встановлено, що потенціалчутливий барвник ціанінового ряду DіOC6(3) зв'язується з енергізованими мітохондріями і його можна використовувати для тестування змін мітохондріального потенціалу. Доведено, що оксид азоту спричиняє зниження потенціалу на внутрішній мембрані мітохондрій. Показано, що калікс[4]арени С-97 та С-99 викликають виражену транзієнтну поляризацію внутрішньої мембрани мітохондрій, що узгоджується з їхнім стимулювальним впливом на Са2+/Н+-обмін.