Даніловський С. В. Регуляція експресії ТР53 та залежних від нього протеїнів у клітинах гліоми лінії U87

Об’єкт: функція генів ТР53, MDM2, PERP, USP7, RBL1, CSNK2, NME6, TOPORS, ZMAT3, TP53BP1 та TP53BP2. Мета: – вивчення залежності експресії генів ТР53, MDM2, PERP, USP7, RBL1, CSNK2, NME6, TOPORS, ZMAT3, TP53BP1 та TP53BP2 від функціональної активності сигнального ензиму стресу ендоплазматичного ретикулума ERN1 за умов гіпоксії та дефіциту глутаміну або глюкози у клітинах гліоми лінії U87. Методи: культивування клітин гліоми лінії U87 та її субліній, виділення тотальної РНК, спектрофотометричні методи визначення кількості та спектральних характеристик РНК, електрофорез нуклеїнових кислот, зворотна транскрипція, полімеразна ланцюгова реакція, кількісна полімеразна ланцюгова реакція, отримання цитозольних та ядерних фракцій протеїнів із культур клітин, осадження секреторних протеїнів з культурального середовища, спектрофотометричне визначення кількості протеїнів, електрофорез протеїнів у поліакриламідному гелі, імуноблотинг, комп’ютерний аналіз результатів кількісної полімеразної ланцюгової реакції, статистичні методи обробки даних. Вперше було показано, що експресія генів ТР53, MDM2, PERP, USP7, RBL1, CSNK2, NME6, TOPORS, ZMAT3, TP53BP1 та TP53BP2 у клітинах гліоми лінії U87 залежить від функціональної активності ERN1, сенсорно-сигнального ензиму стресу ендоплазматичного ретикулума. Виявлені зміни в експресії досліджених генів корелюють зі зменшенням інтенсивності проліферації клітин з пригніченою активністю ERN1. Встановлено, що зміни в експресії генів ТР53, MDM2 та USP7 у клітинах гліоми за умов пригнічення ERN1 обумовлені виключенням саме кіназної, а не ендорибонуклеазної активності ензиму ERN1, а гена PERP – обома активностями..