Цимбал Д. О. Роль сигнального ензиму IRE1 у регуляції експресії про- та анти-проліферативних генів у клітинах гліоми

Об’єкт: механізми IRE1-залежної експресії генів транскрипційних факторів, що контролюють процеси проліферації, та пухлинних супресорів за умов гіпоксії та дефіциту глутаміну або глюкози у клітинах гліоми лінії U87. Мета: встановити можливу участь генів транскрипційних факторів та пухлинних супресорів, що контролюють процеси проліферації, у IRE1-залежному рості злоякісних пухлин шляхом дослідження їх експресії у клітинах гліоми лінії U87 за умов повного або часткового пригнічення функції IRE1, основного сенсорно-сигнального ензиму стресу ендоплазматичного ретикулума, а також за умов гіпоксії, дефіциту глюкози та глутаміну у середовищі. Методи: культивування клітин, виділення РНК та екстрактів протеїнів, спектрофотометричні методи визначення кількості та якості зразків РНК, синтез кДНК, методи полімеразної ланцюгової реакції, електрофоретичний аналіз нуклеїнових кислот, рестрикційний аналіз плазмідних ДНК, методи молекулярного клонування, ліпосомної трансфекції клітин, вестерн-блот, метод люциферазного репортера, методи статистичного аналізу. Вперше отримано дані про те, що експресія генів HOXC6, ATF3, TBX3, TBX2, MAZ, SNAI2/SLUG, TCF3, TCF8, MYBL1, MYBL2, FOXF1, EPAS1, E2F8, MEST, CD24, KRT18, ING1, ING2, IL13RA2 та MYRL2 у клітинах гліоми лінії U87 залежить від функціональної активності IRE1. Зміни в експресії досліджуваних генів узгоджуються з даними літератури щодо пригнічення проліферації клітин гліоми за умов виключення IRE1 та можуть відігравати ключову роль у IRE1-залежному контролі проліферативних процесів. Транскрипційні фактори HOXC6 та TBX2, а також субодиниця А2 рецептора інтерлейкіну 13 є перспективними мішенями для досліджень у галузі пошуку нових препаратів для лікування гліом. Отримані результати розширюють уявлення про молекулярні механізми, що лежать в основі IRE1-опосередкованого контролю проліферації пухлинних клітин.