В дисертацiйній роботі викладено теоретичне та експериментальне обґрунтування, узагальнені результати дослідження щодо розробки, впровадження та гармонізації відповідно до вимог ЄС препарату «ППД-туберкулін для ссавців очищений». Відібрані шляхом селекції, задепоновані виробничі штами M. bovisValleе КМІЕВ-9 та M. bovis Valleе КМІЕВ-9КМ виявились високо-протеїногенними, відповідають вимогам Директиви Ради ЄС 97/12 (від 17 березня 1997 р.) і використані під час виготовлення дослідно-виробничих серій ППД-туберкуліну для ссавців очищеного.
Масова частка білка в пробі туберкуліну, виготовленого з штаму M. bovis Valleе КМІЕВ-9 становить (0,89+0,1) мг/см3, а в пробі туберкуліну з штаму M. bovis Valleе КМІЕВ-9КМ достовірно більше і становить (1,20+0,2) мг/см3. Виробничий штам мікобактерій M. bovis Valleе КМІЕВ-9KМ при культивуванні на синтетичних живильних середовищах дозволяє прискорити ріст і підвищити накопичення бактерійної маси мікобактерій з одного флакона на (16,1+0,2) мг і дає можливість відповідно збільшити вихід туберкуліну до (1,20+0,1) мг/см3 .
Для адаптації, селекції та накопичення бактерійної маси виробничих штамів розроблені живильні середовища Сотона КФ та Сотона ХБ, на яких культура M. bovis починає рости раніше на (4,2+1,1) доби і дає більше накопичення бактерійної маси, мікробна плівка формується на (4,1+0,9) доби раніше, в порівнянні з вихідним штамом.
Розроблено нові технологічні прийоми виготовлення ППД-туберкуліну з використанням методів мембранної мікрофільтрації та ультрацентрифугування при 14 тис. об./хв., що дозволило отримати високоактивний та специфічний діагностичний алерген. Під час виготовлення туберкуліну з використанням розробленої технології в препараті достовірно збільшується вихід протеїну після осадження ТХО (на 8,6+0,5 г), вихід туберкуліну з 1 л середовища (на 0,7+0,1 г) та масова частка білка (на 0,6+0,1 мг/см3). Препарат виходить гарантовано стерильним та високоочищеним.
Для проведення контрольних досліджень дослідно-виробничих серій туберкуліну розроблено спосіб визначення активності очищеного (ППД) туберкуліну для ссавців на тваринах, сенсибілізованих авірулентними культурами M. bovis. Розроблений спосіб є специфічним та безпечним для здоров'я тварин та людей, запобігає розповсюдженню живих мікобактерій у природі.
Дослідно-виробничі серії ППД-туберкуліну для ссавців очищеного виявили високу діагностичну активність та специфічність. Активність випробовуваних серій туберкуліну №1 (Е) та № 2 (Е) становила 49000 МО/см3 та 47000 МО/см3 відповідно, що відповідає вимогам ДСТУ 4664:2006 та Директиви Ради ЄС 97/12 від 17 березня 1997 р., згідно з якою туберкулінізацію тварин проводять із використанням туберкулінів РРD або HCSM, які повинні виготовлятися з штамів M. bovis «AN5» або «Valleе».
