Савінова І. В. Отримання, стабілізація, культурально-морфологічні характеристики культур клітин амфібій та рептилій, чутливих до вірусів тварин

Об’єкт дослідження: первинні культури клітин, субкультури та стабільні клітинні культури, отримані від холоднокровних хребетних тварин, представників класів Амфібії (Amphibia) та Рептилії (Reptilia). Мета: отримання нових стабільних культур клітин від наземних пойкілотермних хребетних тварин, представників класів Амфібії (Amphibia) та Рептилії (Reptilia), вивчення їх культурально-морфологічних властивостей та можливостей використання у ветеринарній вірусології та біотехнології. Методи досліджень: методи отримання культур клітин (первинних експлантатів та трипсинізації: холодова, теплова, без підігріву); метод підтримання культур клітин шляхом послідовних пересівів, цитоморфологічний; мікроскопічний; вірусологічний; іммуноцитохімічний; мікробіологічний; каріологічний аналіз; статистичні методи. Вперше в Україні отримано культури клітин пойкілотермних хребетних тварин класів Амфібії (Amphibia) та Рептилії (Reptilia). Визначено оптимальні субстрати, середовища і умови культивування та отримано субкультури з первинних культур клітин пула внутрішніх паренхіматозних органів жаби шпоркової гладенької (Xenopus laevis), черепахи червоновухої (Trachemys scripta elegance), а також шкірно-м’язевого лоскута від ящірки прудкої (Lacerta agilis). Визначена цитоморфологічна характеристика отриманих клітинних культур холоднокровних тварин. Відпрацьовано методи малоінвазивного отримання тканинних зразків від тварин-донорів, які в подальшому можуть бути використані для ініціації клітинних ліній від рідкісних видів тварин. Отримано стабільну клітинну культуру з найбільш перспективних субкультур та вивчено її біологічні, морфологічні та антигенні властивості. Виявлена чутливість отриманих культур клітин до деяких вірусів. Наукова новизна дисертаційної роботи підтверджена патентом на корисну модель № 91485 «Спосіб отримання первинних культур клітин хребетних холоднокровних тварин» патент України від 10.07.2014 та патентом України на корисну модель № 114779 «Перещеплювана клітинна лінія з тканин черепахи, TF (Testudo fibroblasts)» від 27.03.2017. Результати досліджень впроваджені у практику у вигляді методичних рекомендацій «Методичні рекомендації з отримання первинно-трипсинізованих культур клітин холоднокровних тварин», які схвалено та затверджено Методичною комісією (протокол № 1 від 03.07.2014 р.) та Вченою радою Інституту ветеринарної медицини НААН (протокол № 4 від 09.07.2014 р.) і Державною ветеринарною та фітосанітарною службою України (протокол № 1 від 25.12.2014) як такі, що можуть використовуватись у навчальному процесі та наукових дослідженнях на кафедрах вищих закладів освіти України та у науково-дослідних інститутах. Сфера (галузь) використання. Ветеринарна вірусологія та біотехнологія; вивчення епідемічних та епізоотичних процесів та взаємодії вірус-клітина; вивчення екології та еволюції вірусів; модельна система для виділення та вивчення вірусів-збудників захворювань рептилій та амфібій; модельна система для токсикологічних, цитогенетичних, біохімічних та інших досліджень