Самойленко В. А. Дослідження структурно-функціональної організації плазміди pSM1 та створення вектора для ціанобактерії Plectonema boryanum

В дисертаційній роботі представлено результати дослідження структурно-функціональної організації плазміди pSM1 та придатності ціанобактерії Plectonema boryanum CALU 465 для конструювання системи вектор господар. Отримані результати дозволили створити нову ефективну та функціонуючу векторну систему. При допомозі рестрикційного аналізу для pSM1 була побудована фізична карта. Аналіз встановленої нуклеотидної послідовності дозволив дослідити механізм її реплікації а також локалізацію та розміри гену rep та ori. Показано, що клітини P. boryanum вияявились чутливими до ампіциліну, тетрацикліну, хлорамфеніколу, стрептоміцину та канаміцину. Також встановлено, що ціанобактеріальним клітинам властива неспецифічна нуклеазна активність, асоційована на поверхні клітинної стінки. В зв'язку з цим, найбільш придатним шляхом введення вектора в ціанобактеріальні клітини є метод кон'югативного переносу. Визначені його оптимальні умови. Створені конструкції pSTS-серії було введено в клітини P. boryanum з метою визначенняїх векторних властивостей. Встановлено, що повноцінний вектор повинен містити повнорозмірну ціанобактеріальну плазміду з цілісними генами Rep-білка та ori. Таким вектором виявилась конструкція pSTS4, яка здатна підтримуватись як в клітинах ціанобактерії P. boryanum так і в клітинах E. coli.