Іванко О. В. Колагеназа і кератиназа стрептоміцетів

Дисертація присвячена виділенню та дослідженню колагенази і кератинази стрептоміцетів. Проведено скринінг серед 364 штамів - представників різних таксономічних груп (мікроміцети, дріжджі, бацили і стрептоміцети) на здатність синтезувати колагеназу і кератиназу, в результаті чого відібрано два ефективні продуценти ферментів Streptomyces sp. 1349 і Streptomyces sp. 1382. Дослідження гетерогенності популяцій штамів-продуцентів дало можливість відібрати серед колоній дикого типу продуцента колагенази морфологічний варіант, активність якого була в 2,3 рази вище вихідної і зберігалася протягом двох років. Встановлено, що хлорид амонію і соєве борошно здатні активувати біосинтез колагенази культурою Streptomyces sp. 1349 в 5-6 разів, а овеча шерсть або куряче пір'я як єдине джерело вуглецю і азоту в середовищі підвищують вихід кератинази у Streptomyces sp. 1382 майже в 7 разів. Із культуральних рідин продуцентів виділено і очищено до гомогенного стану високоактивні препарати колагенази і кератинази. Показано,що колагенолітичну дію мають принаймні три протеази, дві з яких є металопротеазами, а одна відноситься до протеаз серинового типу. За кератиназну активність Streptomyces sp. 1382 відповідають дві протеази серинового типу. Були досліджені фізико-хімічні властивості очищених ферментів, специфічність їх дії. Встановлено, що препарати відрізняються за молекулярними масами, компонентним складом, оптимальними умовами дії, чутливістю до катіонів металів і аніонів. Колагенази проявляли широку специфічність дії щодо білкових субстратів різної природи. Навпаки, кератинази гідролізують лише нативний кератин шерсті або пір'я, а також один з ферментів проявляє фібринолітичну активність. Встановлено, що колагенази Streptomyces sp. 1349 не мають серологічної спорідненості з ферментом, виділеним з Clostridium histolyticum ("Merk"). Вперше було показано інгібуючу дію деяких координаційних сполук германію, похідних гуанідину і інгібіторів вірусного протеолізу на колагеназну і кератиназну активність Streptomyces sp. 1349 i Streptomyces sp. 1382, що може бути використано при створенні високоефективних препаратів для лікування захворювань шкіри, які спричиняються колагеназами і кератиназами мікроорганізмів, а також в інших галузях народного господарства.