Болтовець П. М. Взаємодія антиген-антитіло в умовах поверхневого плазмонного резонансу та застосування цього явища для визначення вірусспецифічних макромолекул

Дисертацію присвячено розробці підходу до визначення вірусів безпосередньо в клітинних гомогенатах за допомогою специфічних антитіл методом поверхневого плазмонного резонансу. Запропоновано нову модифікацію поверхні сенсора для визначення вірусів шляхом формування на його поверхні мономолекулярного шару з ефективним негативним зарядом, що запобігає денатурації білків і забезпечує їх орієнтовану іммобілізацію. Розроблено і випробувано на прикладі вірусу тютюнової мозаїки загальний підхід до виявлення і кількісного визначення вірусів методом ППР за допомогою специфічних антитіл, іммобілізованих на модифікованій KNCS і білком А St. aureus поверхні сенсора. На прикладі культури зеленої водорості Bracteаcoccus minor, інфікованої ВТМ на стадії зооспор, показано, що така модифікація поверхні сенсора дозволяє адекватно визначати вірус в клітинних гомогенатах, що підтверджено методами ІФА і світлової мікроскопії. На моделі структурного білка Х-вірусу картоплі і гексону аденовірусу типу 2 показано можливість використання такого підходу для визначення вірусних білків. Запропоновано нову оригінальну процедуру кількісного визначення вірусу шляхом іммобілізації комплексу специфічні IgG-вірус на модифіковану тіоціанатом і білком А поверхню сенсора. На прикладі Nicotiana tabacum, за допомогою вказаного підходу було досліджено розвиток вірусної інфекції у рослинах. Було отримане узгодження між даними ППР і ІФА.