Дрель В. Р. Ідентифікація і характеристика білків-партнерів, що взаємодіють із SH3-вмісним адаптерним білком Ruk в клітинах ембріональної нирки людини лінії HEK293

Об'єкт: білок-білкові взаємодії, опосередковані адаптерним білком Ruk. Мета: пошук та характеристика білків-партнерів, які взаємодіють із адаптерним білком Ruk. Методи досліджень: ПЛР, культури клітин, імунофлуоресцентна мікроскопія, трансфекція, афінна хроматографія, Вестерн-блотинг, затримка ДНК-білкових комплексів при електрофорезі в ПААГ. Встановлено, що адаптерний білок Rukl може локалізуватись як в цитоплазмі, так і в ядрі клітин HEK293 та U937. Розроблено схеми очистки рекомбінантного білка Rukl Glu-tagged та ендогенного білка Rukl із лізатів клітин HEK293, що ґрунтуються на використанні афінних сорбентів. Показано, що афінно очищені препарати рекомбінантного і ендогенного Rukl асоційовані з білками, які володіють здатністю як зв’язуватись із ДНК, так і гідролізувати останню. Здійснено картування C-кінцевого суперспіралізованого “coiled-coil” району Rukl як області, що відповідає за взаємодію з нуклеазою/(нуклеазами). Висунуто припущення стосовно біологічної ролі надмолекулярних комплексів адаптерного білка Rukl із ендонуклеазами в регуляції катаболізму ДНК при індукції апоптозу клітин. Сфера використання - клітинна та молекулярна біологія.