Мелешко Р. А. Одержання біологічно-активного пролактину людини із використанням бакуловірусної експресійної системи

Дисертація присвячена вивченню експресії рекомбінантного пролактину людини з використанням бакуловірусної експресійної системи (БЕС) та розробці лабораторної методики одержання і очищення біологічно-активного рекомбінантного пролактину людини. Вперше було синтезовано рекомбінантний PRL людини в бакуловірусній експресійній системі на основі ВЯП Malacosoma neustria (Mane). Сконструйовано рекомбінантні бакуловіруси, що забезпечують експресію внутрішньоклітинного та секретованого рекомбінантного пролактину людини в клітинах комах. Відпрацьовано умови культивування клітин, інфікування їх вірусом, визначено оптимальний час після інфікування для збору клітин і середовища з метою досягнення максимальних рівнів експресії пролактину, розроблено методи очищення біологічно-активного рекомбінантного пролактину людини, що дозволяє отримати дві форми рекомбінантного гормону - внутрішньоклітинну і секретовану у кількостях 60 мг і 10 мг білка відповідно на один літр поживного середовища. На базі проведених досліджень запропоновано лабораторну методику одержання біологічно-активного рекомбінантного очищенного пролактину людини.