Дмитрук К. В. Ідентифікація структурних та регуляторних генів біосинтезу рибофлавіну у флавіногенних дріжджів Candida famata

Об'єкт дослідження: біосинтез рибофлавіну та його регуляція у флавіногенних дріжджів C. famata. Мета дослідження: ідентифікувати структурні та регуляторні гени біосинтезу рибофлавіну у флавіногенних дріжджів C. famata. Методи дослідження: молекулярно-генетичні, генно-інженерні, мікробіологічні, біохімічні. Методом гомологічної / гетерологічної комплементації клоновано гени RIB1, RIB2, RIB5, RIB6 та RIB7 з банку генів C. famata що кодують ГТФ-циклогідролазу ІІ, 2,5-диаміно-4-окси-6-рибозиламінопіримідин -5'-фосфатредуктазу, 6,7-диметил-8-рибітиллюмазин-синтазу, 3,4-дигідрокси-2-бутанон-4-фосфатсинтазу та рибофлавінсинтазу, відповідно. За допомогою полімеразної ланцюгової реакції ізольовано та ідентифіковано ген RIB3 D. hansenii, що кодує 2,5-диаміно-4-окси-6-рибітиламінопіримідин -5'-фосфатдезаміназу. Показано, що альфа'-субодиниця казеїнкінази 2 опосередковано залучена у регуляцію біосинтезу РФ. За допомогою оптимізованого для C. famata методу інсерційного мутагенезу, вперше ідентифіковано регуляторнігени позитивного типу дії, що контролюють флавіногенез у дріжджів C. famata: CfMET2 (гомосерин-О-ацетилтрансфераза) та CfSEF1 (потенційний транскрипційний фактор). Сферою використання є біотехнологія.