Куцяба В. І. Взаємодія регуляторних генів біосинтезу рибофлавіну і конструювання штамів-надсинтетиків цього вітаміну у дріжджів Pichia guilliermondii.

Об'єкт - регуляція біосинтезу рибофлавіну (РФ) та асиміляції заліза у дріжджів Pichia guilliermondii. Мета - дослідження властивостей регуляторних мутантів біосинтезу РФ, взаємодії регуляторних генів флавіногенезу та впливу мутацій резистентності до аналогів пуринів на продуктивність флавіногенезу у дріжджів P. guilliermondii. Методи дослідження - біохімічні, класичної та молекулярної генетики, статистичні. Встановлено, що мутації rib80-22, rib83-6 - рецесивні, ядерні і моногенні. Вони викликають порушення регуляції як біосинтезу РФ, так і асиміляції заліза. Регуляторні гени RIB80 і RIB81, RIB81 і HIT1 взаємодіють між собою за синергідним типом. Мутація rib83-6 блокує надсинтез РФ і дерепресію синтезу фементів флавіногенезу у мутантів rib80, rib81 і у подвійних мутантів rib80 rib81. Створено систему для клонування регуляторного гена RIB83 позитивного типу дії з використанням як реципієнта сконструйованого потрійного мутанта rib1-86 rib81 rib83. Введенням у геном мутанта генотипу rib80 rib81 мутацій резистентності до аналогів пуринів 8-азагуаніну і 4-амінопіразол[3,4-d]піримідину отримано штами, які синтезують 1,7 г РФ в 1 л синтетичного середовища у лабораторному ферментері. Показано позитивний вплив препарату кормового РФ, отриманого за допомогою одного із селекціонованих штамів, на вагу курей і їх яєць. Сфера використання - метаболічна інженерія, біотехнологія.