Василовська С. В. Функціональна характеристика клітин-попередників кордової крові в умовах культивування in vitro

Дисертація присвячена дослідженню впливу різних умов культивування на функціональну активність гемопоетичних клітин-попередників кордової крові (ГКП КК), та визначенню оптимальних умов довготривалої підтримки кровотворення in vitro. Показано, що підтримка кровотворної активності ГКП КК у довготривалій культурі можлива з використанням у якості фідерного шару мітотично інактивованих клітин строми фетальної печінки (ФП) 7-8 тижнів гестації і фетальної кістки (ФК) 10-11 тижнів гестації. Максимальні значення показників кількості та клоногенної активності ГКП отримано на 3-му тижні культивування. Встановлено, що фідерний шар ФП більш ефективний у підтриманні гемопоезу in vitro, ніж фідер ФК. Додавання в культуральну систему, що містить фідерний шар ФП, комплексу екзогенних цитокінів (GM-CSF, IL-3, SCF, IL-6) стабілізувало позитивну динаміку зростання як чисельності ядровмісних клітин, так і клоногенних попередників (КУО-ГМ) протягом 5 тижнів дослідження і призводило до 80-разового збільшення загальної кількості клоногенних ГКП у порівнянні з їх вмістом у вихідній суспензії. Найбільш виражений стимулюючий ефект фактора росту Flt-3 визначено після 16-годинної інкубації з ним клітин фракції АС133+. Подальше довготривале культивування АС133+ на фідерному шарі зі строми фетальної печінки з цитокінами призводило до збільшення в 55 разів кількості ядровмісних клітин у суспензії, а також зростання відсотка клоногенних попередників з 4,2% – у вихідній фракції до 35,1% на 5-му тижні культивування.