Левішко А. С. Фізико-хімічні властивості і субстртна специфічність протеаз Bacillus sp. 27, Bacillus circulans 693 i Yarrowia lipolytica 2061

English version

Дисертація на здобуття ступеня кандидата наук

Державний реєстраційний номер

0409U004956

Здобувач

Спеціальність

  • 03.00.07 - Мікробіологія

21-10-2009

Спеціалізована вчена рада

Д 26.233.01

Інститут мікробіології і вірусології ім. Д.К. Заболотного НАН України

Анотація

Дисертація на здобуття наукового ступеня кандидата біологічних наук за спеціальністю 03.00.07 - мікробіологія. - Інститут мікробіології і вірусології ім.Д.К. Заболотного НАН України, Київ, 2009. Дисертація присвячена виділенню та дослідженню протеаз Вacillus sp. 27, Вacillus circulans 693 та Yarrowia lipolytica 2061. Внаслідок проведеного скринінгу серед 367 штамів мікроорганізмів - представників 4-х родів дріжджів: Debaryomyces, Kluyveromyces, Saccharomyces, Yarrowia та бактерій роду Bacillus відібрано три штами з найвищим рівнем протеолітичної активності - Вacillus sp. 27, В. circulans 693 та Y. lipolytica 2061. Найкращими джерелами вуглецю і азоту, відповідно, для Вacillus. sp. 27 були арабіноза і желатина, В. circulans 693 - глюкоза і комбінація желатини з гідрокарбонатом амонію, для Y. lipolytica 2061 - сорбоза і желатина з гліцином. Культивування на таких середовищах дало можливість підвищити протеолітичну активність Вacillus sp. 27, В. circulans 693 та Y. lipolytica 2061 в 2,7; 3,8 та 3,4 рази, відповідно. Використання як індукторів речовин природного і синтетичного походження свідчить, що бичача кров, еластин, желатина, гемоглобін, казеїн та деякі координаційні сполуки германію, зокрема комплекси бісцитратгерманіевої кислоти з аспарагіновою кислотою і з метіоніном, призвело до підвищення біосинтезу ферментів в 2,3 - 5,8 рази. В результаті очистки культуральних рідин виділених продуцентів було отримано і очищено 5 активних фракцій: 1(1) та 2(2) Bacillus sp. 27, що мали високий рівень фібринолітичної та еластазної активності, відповідно, 1(1) В. circulans 693 з домінуючими гемоглобінолітичною та фібринолітичною активностями, 1(1) та 1(3) Y. lipolytica 2061, які характеризувались високими рівнями фібринолітичної та желатиназної активності відповідно. Отже, було отримано три препарати з фібринолітичною, один - з гемоглобінолітичною, один - з желатиназною і один - з еластазною активностями. В результаті очистки питома активність ферментів була підвищена для препаратів з фібринолітичною активністю в 11,8; 22 та 33 рази; для препарата з гемоглобінолітичною активністю в 22,4 рази; для препарата з желатиназною активністю в 27 разів, з еластазною активністю в 40 разів. Препарати протеаз всіх трьох продуцентів: Вacillus sp. 27, В. circulans 693, та Y. lipolytica 2061 є протеазами серинового типу, які, ймовірно для прояву активності потребують іонів металів і містять залишки цистеїну поблизу активного центра.

Файли

Схожі дисертації