Обертинська О. В. Поширення ротавірусів на території України та удосконалення методичних підходів до їх визначення в водних обєктах довкілля.

English version

Дисертація на здобуття ступеня кандидата наук

Державний реєстраційний номер

0410U000225

Здобувач

Спеціальність

  • 03.00.06 - Вірусологія

14-01-2010

Спеціалізована вчена рада

Д26.003.01

Анотація

.Об'єкт дослідження: регіональне поширення РВ у водних об'єктах довкілля на території України, циркуляція РВ серед хворих на ГКІ, процеси адсорбції та елюції РВ природними та штучно синтезованими сорбентами. Мета: удосконалити методичні підходи до визначення ротавірусів людини у воді та вивчити регіональні особливості їх поширення у водних об'єктах довкілля на території України та серед хворих на гострі кишкові інфекції, дати молекулярно-генетичну характеристику виділеним збудникам.. Методи: при виконанні роботи використані класичні та сучасні методи вірусологічного дослідження: стаціонарне та ролерне культивування культур клітин, виділення та типування вірусів, визначення інфекційного титру, індикація РВ методами непрямої гемаглютинації (РНГА), імуноферментного аналізу (ІФА), простими/ швидкими тестами, методом флуоресціюючих антитіл (МФА) та методами електронної мікроскопії. Ряд досліджень виконано із застосуванням молекулярно-генетичних методів: виділення РНК вірусів, полімеразна ланцюгова реакція із зворотною транскрипцією (ПЛР-ЗТ), електрофоретичний аналіз, ПЛР в реальному часі, мультиплексна ПЛР з гібридизаційно-флуоресцентною детекцією продуктів ампліфікації. Статистичний метод використовувався на всіх етапах роботи для обробки результатів дослідження, визначення вірогідності отриманих даних.Теоретичні і практичні результати: полягають в експериментальному обґрунтуванні нового способу концентрації ротавірусів з води, удосконаленні методичних підходів і схем концентрування, пропозиції алгоритмів санітарно-вірусологічного дослідження стічної, питної та води поверхневих і підземних водоймищ для моніторингу ротавірусної інфекції. Вивченні особливостей циркуляції ротавірусів різноманітних генотипів на території України та серед хворих ГКІ, отриманні даних молекулярно-генетичної характеристики виділених штамів, в тому числі штамів, що мають глобальне поширення P[8]G1, P[8]G2, P[8]G3, P[8]G4, P[4]G2. Новизна. Вперше розроблено та обґрунтовано новий спосіб концентрації РВ з води з використанням штучно синтезованого та стандартизованого сорбенту ГГМКК, вивчені основні чинники впливу на процеси адсорбції та елюції РВ людини та тварин, встановлено високу адсорбційну активність ГГМКК по відношенню до РВ людини, визначені оптимальні параметри ефективної адсорбції та найефективніші умови елюції. Встановлено поширення ротавірусів людини групи А на території України, визначено їх [Р]G-генотипи та удосконалено санітарно-вірусологічний контроль якості води різного виду водокористування і ступеня забруднення по відношенню до її епідемічної безпеки. Ступінь впровадження полягає у тому, що вірусологічні лабораторії СЕС України отримали Методичні вказівки санітарно-вірусологічного контролю якості водних об'єктів затверджених наказом МОЗ України від 30.06.2007 року за номером 284. В цьому нормативному документі автором написані розділи 3,4,5 и 6, в яких представлені схеми, алгоритми санітарно-вірусологічного дослідження води різного виду водокористування та забруднення, а також способи концентрації та індикації ротавірусів, виділення в культурі клітин і ідентифікація виділеного агенту. Сфера (галузь) використання: медицина.

Файли

Схожі дисертації