Галкін О. Ю. Біотехнологія одержання та використання моноклональних антитіл до IgM людини

У дисертаційній роботі представлені результати досліджень по розробці біотехнологічних основ одержання та використання моноклональних антитіл до IgМ людини. Одержано оригінальний набір із 21 нового клону гібридом, продуцентів МКАТ проти IgM людини. Визначено специфічність МКАТ, їх константу афінності та титр у культуральній рідині. Встановлено, що епітопна структура молекули IgM людини містить три основні епітопні регіони (ЕР): А, В і С. До ЕР А відноситься 1 домінуючий епітоп А1, що представлений найбільшим числом високоафінних МКАТ, та 2 суміжних епітопи А2 й А3 із середньою афінністю. ЕР В містить 2 прилеглих епітопи В1 та В2 із МКАТ середнім значенням афінності. До складу ЕР С входить лише 1 епітоп із МКАТ середньої афінності. Доведено, що епітопна специфічність анти-IgM МКАТ залежить від схеми імунізації. Короткострокова схема імунізації приводить до моноспецифічності антитіл проти ЕР-А, а при довгостроковій схемі отримані МКАТ спрямовані на антигенні детермінанти ЕР-В та ЕР-С. Доведена можливість використання кон'югатів 2-х МКАТ у складі ІФА тест-систем для діагностики цитомегалії й Епштейн-Барр вірусної інфекції, також 3-х МКАТ у складі імуносорбенту наборів для діагностики токсоплазмозу, краснухи та урогенітального хламідіозу та простого герпесу. Розроблено високочутливий ІФА набір для кількісного визначення IgM-антитіл із аналітичною чутливістю 11 нг/мл. Запропоновано методику специфічного виділення IgM людини із використанням імуноафінного сорбенту на основі отриманих анти-IgM МКАТ.