Пиняга Ю. В. Розробка системи генетичної трансформації у флавіногенних дріжджів Pichia guilliermondii

Об'єкт дослідження: біосинтез РФ та його регуляція у флавіногенних дріжджів P. guilliermondii. Мета роботи: розробка системи генетичної трансформації флавіногенних дріжджів P. guilliermondii та її застосування для ідентифікації регуляторних генів біосинтезу РФ у даних дріжджів. Методи дослідження: мікробіологічні, молекулярно-генетичні, біохімічні, математичної статистики. Вперше розроблено ефективні системи генетичної трансформації P. guilliermondii, які базуються на використанні гетерологічного гена URA3 S. cerevisiae і гомологічного гена FES1 як селективних маркерів та ura3 і fes1 мутантів P. guilliermondii як штамів-реципієнтів, відповідно. Вперше селекціоновано делеційні мутанти P. guilliermondii з делецією генів біосинтезу рибофлавіну: RIB1 та RIB7,та інших генів: YFH1; FES1; VMA1. Встановлено роль дріжджового гомолога фратаксину (Yfh1p) у регуляції біосинтезу РФ, гомеостазу заліза й асиміляції сульфату в клітинах даного виду дріжджів. Опрацьовано систему інсерційного мутагенезу для P. guilliermondii. Розроблено систему селекції для клонування регуляторних генів негативного типу дії, що контролюють флавіногенез у дріжджів P. guilliermondii. Ідентифіковано ген VMA1, який залучений у регуляцію біосинтезу РФ і гомеостазу заліза у P. guilliermondii. Сфери застосування: мікробіологія, генетика, біотехнологія, біохімія.