Зажицька М. О. Механізми формування треку ДНК при кометному електрофорезі ізольованих клітин

Об'єкт: просторова орагнізація ДНК в ядрах клітин. Мета: встановити фізичні механізми формування треку ДНК (хвоста комети) під час кометного електрофорезу ізольованих клітин та з'ясувати фактори, що впливають на електрофоретичну рухливість ДНК. Методи: виділення лімфоцитів із цільної крові, лізис клітин в агарозних блоках, нейтральний та лужний варіанти електрофорезу ізольованих клітин, світлова та флуоресцентна мікроскопія, спектрофотометричні методи, статистичні та теоретичні методи хімічної кінетики. Результати: встановлено кінетику формування треку ДНК при електрофорезі ізольованих клітин, а також зовнішні фактори, що на неї впливають, запропоновано підхід до оцінки рівня надспіралізації петельних доменів, встановлено факт оборотності утворення зони хвоста комети, запропоновано підхід до диференціації різних рівнів пошкодженності ДНК з використанням інтеркаляторів, запропоновано модель взаємодії ДНК з білками ядерного матриксу. Новизна: вперше проведено реєстрацію кінетики формування хвоста комети для інтактних та опромінених лімфоцитів в умовах нейтрального та лужного варіантів електрофорезу; вперше встановлено, що вихід ДНК з нуклеоїдів є оборотним; підтверджено модель топологічної взаємодії білків ядерного матриксу з ДНК, а також показано, що така взаємодія є необхідною умовою формування зони хвоста комети при електрофорезі. Сфера використання: біофізика, біохімія, молекулярна біологія, генетика. Результати дисертації впроваджені в навчальний процес ННЦ "Інститут біології" Київського національного університету імені Тараса Шевченка.