Древаль К. Г. Біотехнологічні особливості базидіальних грибів - продуцентів целюлозолітичних ферментів

Представлені результати досліджень з отримання нових штамів - продуцентів ензимів целюлозолітичного комплексу та розробки біотехнологічного способу отримання ферментних препаратів з культуральної рідини базидіальних грибів. Дослідження на 61 штамі базидіоміцетів, що відносяться до 18 видів 17 родів, дали змогу відібрати та дослідити 4 нових оригінальних штами базидіальних грибів - продуцентів целюлаз. В процесі культивування отриманих продуцентів встановлено оптимальні умови протікання синтезу целюлаз (температура та початкова кислотність живильного середовища), динаміку целюлозолітичної активності ензимів у культуральних фільтратів базидіоміцетів, підібрано оптимальний склад живильного середовища за джерелами вуглецевого та азотного живлення. В результаті проведеної роботи розроблено спосіб отримання ензиматичного препарату целюлаз з культуральної рідини базидіоміцетів, принциповою новизною якого є елюція целюлаз з субстрату культивування. Застосування такого способу дозволяє в 3 етапи (висолювання білків - діаліз - гель-хроматографія) отримати ензиматичні препарати целюлаз із високим ступенем очищення. На основі розробленого способу отримання целюлозолітичних препаратів одержано оригінальні препарати целюлаз базидіальних грибів штамів Irpex lacteus К-1, А-Дон-02, Д-1 та Daedaleopsis confragosa f. confragosa AnSc-1, які можуть бути використані у різноманітних галузях біотехнології. Порівняльно вивчено основні фізико-хімічні характеристики (рН- та термооптимуми, стабільність за тривалої дії рН та температури) та супутні ензиматичні активності препаратів целюлаз, отриманих з культуральної рідини базидіоміцетів у лабораторних умовах, з препаратами целюлаз нижчих грибів як комерційного, так і лабораторного походження. Доведено, що целюлозолітичні ензими базидіоміцетів є активнішими порівняно із ензимами, отриманими з нижчих грибів. Встановлено, що ензиматичні препарати целюлаз як базидіоміцетів, так і нижчих грибів проявляють низку супутніх ензиматичних активностей, однак препарати целюлаз базидіального походження мають значно вищу активність ензимів, які руйнують крохмаль, пектин та лігнін.