Малюкіна М. Ю. Чутливість трансмембранних потенціалів ізольованих гепатоцитів до агонист-залежної регуляції на різних стадіях кріоконсервування.

Об'єкт дослідження: вплив різних етапів кріоконсервування на динаміку регуляції плазматичного і мітохондріального потенціалів за умов активації клітин альфа-адреноагоністом. Мета дослідження:оцінка функціональної цілісності сигнальних систем гепатоцитів та їх функціонального стану на різних етапах кріоконсервування за допомогою тест-системи, яка грунтується на мікрофлуориметричному визначенні змін трансмембранних потенціалів при дії агоніста. Методи дослідження: мікрофлуоріметрія, мікроспектрофлуоріметрія люмінесцентна спектроскопія, спектрофотометрія. З'ясовано, що зміни трансмембранного потенціалу плазматичної мембрани гепатоцитів у відповідь на фенілефрин мають фазовий характер з двома фазами гіперполяризації, що регулюються за участю різних механізмів. Даний характер індукованих коливань потенціалу плазматичної мембрани зберігався при визначенні за допомогою протилежно заряджених зондів DiOC2 та SqSC4. Зміни трансмембранного потенціалу плазматичної мембрани супроводжувалися підйомом потенціалу мітохондрій, що визначалося по зростанню флуоресценції агрегатів зонду JС-1 у гепатоцитах. Встановлено, що особливості динаміки мітохондріальної відповіді дають уявлення щодо цілісності і функціонуванні систем сигнальної передачі у клітинах. Показана можливість застосування даного підходу для оцінки функціонального стану клітин, які були піддані кріовпливу. Флуоресцентна оцінка агоніст-індукованих змін потенціалів дозволяє виявляти латентні порушення у внутрішньоклітинних сигнал-передавальних системах при кріоконсервуванні, а також порівнювати ефективність застосування різних протекторних сполук для запобігання або корекції даних порушень.