Новікова О. Ю. Морфофункціональні характеристики кріоконсервованих похідних нервового гребеня, отриманих з різних джерел

Об’єкт дослідження – вплив кріоконсервування в кріозахисних середовищах на основі диметилсульфоксиду (ДМСО) та його комбінації з білково-пептидними добавками на морфологічні, фенотипічні, цитологічні показники 2D- та 3D-культур, отриманих з наднирників (НН) та дермальної папіли (ДП) неонатальних тварин. Мета роботи – дослідити вплив кріоконсервування в кріозахисному середовищі на основі ДМСО та білково-пептидних добавок на морфологічні, функціональні, цитогенетичні властивості 2D- та 3D-культур, отриманих з НН та ДП неонатальних тварин. Методи дослідження: ферментативне виділення клітин з тканини НН, метод експлантів для виділення культур клітин ДП вібріси, моношарове (2D) та об’ємне (3D) культивування, програмне заморожування; імуноцитохімічний, цитофлуориметричний методи – для визначення експресії імунофенотипових маркерів, методи цитологічного аналізу – для вивчення мітотичного режиму та патологій поділу клітин ДП, світлова та флуоресцентна мікроскопія – для дослідження морфології клітин, морфометричний аналіз, методи статистичного аналізу. Вперше встановлено, що культивування в безсироватковому середовищі сприяє спонтанному формуванню мультиклітинних сфероїдів (МС) в культурі ДП неонатальних кроликів. Уперше встановлено, що в кріопротекторних середовищах на основі ДМСО та після кріоконсервування в культурі клітин ДП спостерігається віддалений ефект, що полягає у зростанні патологічних поділів клітин та сповільненні росту МС. Встановлені безпечні та ефективні концентрації ДМСО (5 - 7,5 %) при кріоконсервуванні даних об’єктів. Уперше проведено аналіз впливу кріоконсервування на характер експресії хромограніну А – білка секреторних гранул хромафінних клітин до та після кріоконсервування культури клітин з НН неонатальних поросят. Встановлено перерозподіл субпопуляцій у культурі клітин НН у процесі культивування, що проявляється у відносному збільшенні кількості клітин в складі МС. Галузь використання: кріобіологія, біологія, медицина, біотехнологія, ветеринарія, фармація.