Алі С. Г. Культивування та кріоконсервування клітин та мультиклітинних сфероїдів зі спінальних гангліїв неонатальних поросят

Об’єкт дослідження – формування моношарової культури та мультиклітинних сфероїдів (МС) із клітин спінальних гангліїв неонатальних поросят у різних умовах культивування in vitro до та після кріоконсервування з різними концентраціями кріопротектора диметилсульфоксиду (ДМСО). Мета дослідження – отримання культури клітин спінальних гангліїв неонатальних поросят у вигляді моношарової культури та МС, вивчення їх морфофункціональних та імунофенотипових характеристик, а також оцінка впливу кріоконсервування в кріозахисних середовищах із різною концентрацією ДМСО на основні властивості культур. Методи дослідження: методи ферментативного виділення клітин зі спінальних гангліїв, моношарове (2D) і об’ємне (3D) культивування, кріоконсервування, імуноцитохімічний метод, світлова та флуоресцентна мікроскопія, морфометричний аналіз, методи статистичного аналізу. Вперше встановлено, що додавання сироватки до середовища культивування є визначальною умовою для отримання культури у вигляді моношару або МС. Незалежно від способу отримання у культурі були присутні три типи клітин, які експресували маркер мантійних гліоцитів глутамінсинтетазу, маркер нейробластів β-III-тубулін, але не експресували маркер шваннівських клітин S100. Вперше показано, що кріоконсервування культури як у вигляді суспензії поодиноких клітин, так і в складі МС у середовищах, які містили ДМСО в концентраціях 5, 7,5 та 10%, із застосуванням трьохетапного режиму охолодження дозволяло зберегти її основні морфологічні, імунофенотипові та функціональні властивості. Галузь використання: кріобіологія, біологія, медицина, біотехнологія, ветеринарія, фармація.