Андріяш Г. С. Отримання штамів Brevibacterium з підвищеними рівнями синтезу лізину та треоніну

Мета дисертаційної роботи - отримання мутантних штамів-продуцентів лізину та треоніну роду Brevibacterium, вивчення біологічних особливостей та визначення біосинтетичної здатності до підвищеного синтезу цільових амінокислот перспективними штамами.Об'єкт дослідження - мікробіологічний синтез незамінних амінокислот лізину та треоніну. Методи дослідження - мікробіологічні (визначення ауксотрофності), біохімічні, молекулярно-генетичні (виділення ДНК, проведення ПЛР), фізико-хімічні (фізичний та хімічний мутагенез) та статистичне оброблення результатів. Встановлено після дії УФ-опромінення здатність до надсинтезу лізину та треоніну штамами Brevibacterium sp. ІМВ В-7447 та Brevibacterium flavum ІМВ В-7446, відповідно. Філогенетичний аналіз гена 16S рРНК вихідних та мутантних штамів-продуцентів лізину та треоніну дозволив встановити, що гомологія нуклеотидних послідовностей гена 16S рРНК вихідного штаму-продуценту лізину Brevibacterium sp. 90 та мутантного штаму Brevibacterium sp. ІМВ В-7447 складає 98%. Проведений філогенетичний аналіз штаму-продуценту треоніну B. flavum ІМВ В-7446 дозволив переглянути його систематичне положення, як наслідок, штам B. flavum ІМВ В-7446 відноситься до виду Corynebacterium glutamicum. Послідовності гена 16S рРНК штамів Brevibacterium sp. ІМВ В-7447 та B. flavum ІМВ В-7446 (C. glutamicum) зареєстровано в базі даних "GenBank" (реєстраційні номери KT151946 та KT151948, відповідно). Вибір різних цукрів та джерел азоту і оптимізація параметрів культивування мутантних штамів дозволили збільшити накопичення лізину та треоніну в культуральному середовищі. Культури депоновані в "Національному Депозитарії мікроорганізмів" Інституту мікробіології і вірусології ім. Д.К. Заболотного НАН України. Комплекс проведених досліджень дозволив збільшити продукування треоніну штамом B. flavum ІМВ В-7446 (C. glutamicum) та лізину штамом Brevibacterium sp. ІМВ В-7447 в порівнянні з вихідними культурами в 6 та 8 разів, відповідно. Отримані результати є науковим підґрунтям для отримання промислових штамів-продуцентів незамінних амінокислот.