Курільченко І. Ю. Флуоресцентне мічення нанорозмірних контейнерів для візуалізації їх взаємодії з біологічними об'єктами.

English version

Дисертація на здобуття ступеня кандидата наук

Державний реєстраційний номер

0416U002298

Здобувач

Спеціальність

  • 03.00.20 - Біотехнологія

23-05-2016

Спеціалізована вчена рада

Д 26.240.01

Інститут біохімії ім. О.В.Паладіна Національної Академії Наук України

Анотація

Дисертаційну роботу присвячено розробці методу флуоресцентного маркування нанорозмірних контейнерів (ліпосоми та міцели ПАР) для довгострокового моніторингу їх взаємодії з живими клітинами в експериментах in vitro. Метод засновано на використанні явища безвипромінювального перенесення енергії електронного збудження (Foerster Resonance Energy Transfer, FRET) між декількома флуоресцентними зондами, що інкорпоровані в наноконтейнер, та -ратіометричної детекції сигналу флуоресценції донора та акцептора енергії електронного збудження із застосуванням мікроспектроскопії. У роботі детально вивчено взаємодію флуоресцентних зондів (молекул поліметинових та сквараїнового барвників) та FRET між барвниками в нанооб'ємі ліпосом фосфатіділхоліну (ФХ) та міцел додецилсульфата натрію (ДСН). Встановлено, що при створенні FRET-композицій для маркування наноконтейнерів треба враховувати здатність флуоресцентних зондів взаємодіяти один з одним у нанооб'ємі, що може впливати на їх спектроскопічні властивості. Розроблено методику оцінки накопичення флуоресцентних зондів у клітинах за зміною загальної яскравості зображень. Продемонстровано, що FRET-маркування ліпосом надає змогу виявити відмінності в динаміці та ефективності взаємодії наноконтейнерів із клітинами, що пов'язано з різним складом компонентів плазматичних мембран клітин різних типів, їх різною в'язкістю, метаболічною та функціональною активністю клітин.

Файли

Схожі дисертації