Болдирєв О. І. Експресія та функція низькопорогових кальцієвих каналів у таламусі та соматосенворній корі головного мозку щурів в онтогенезі та в експериментальній моделі абсансної епілепсії

Дисертацію присвячено порівняльному аналізу експресії трьох ізоформ основної пороформуючої альфа1-субодиниці низькопорогових кальцієвих каналів (НПКК)Т-типу - Cav3.1, Cav3.2 та Cav3.3 у таламусі й корі головного мозку щурів контрольної лінії Wistarна різних етапах онтогенезу та в щурів з абсансним фенотипомлінії WAG/Rij, пошуку можливих молекулярних регуляторів експресії генів цих каналів, а також співставленню низькопорогових кальцієвих струмів,з профілем експресії мРНК трьох ізоформ в різних типах таламічних нейронів. Розроблено власну модифікацію методу полімеразної ланцюгової реакції для окремих таламічних нейронів, розрізнюваних за типом основного нейромедіатора, який вони синтезують. За її допомогою встановлено, що гальмівні ГАМК-ергічні тазбуджувальні глутамат-ергічні нейрони таламусу експресуютьмРНКCacna1g,Cacna1h,Cacna1i, причому більшість нейронів експресуємРНК 2 чи 3 ізоформодночасно. Т-струми у гальмівних та збуджуючих нейронах відрізняються за електрофізіологічними властивостями несуттєво. Показано, що в латеродорзальному ядрі таламуса на ранніх етапах онтогенезу експресуються всі 3 підтипи НПКК. Кількість мРНК Cav3.1 та Cav3.3 на 10-й постнатальний день знаходиться на співставному рівні тоді як рівень мРНК Cav3.2 є значно нижчим. На 25-й день значно зменшується рівень мРНК Cav3.1 та Cav3.2, а Cav3.3 майже не змінюється. Встановлено, що в щурів лінії WAG/Rij віком 6 місяців збільшена кількість мРНКальфа1-субодиниць Т-каналів у структурах мозку, задіяних в епілептогенезі - сітчастому ядрі таламусу та соматосенсорнійкорі, що відповідає за верхню губу та вібриси порівняно зі щурами лінії Wistar. Підвищення рівня мРНКCacna1g у корі складає 150%, а збільшення експресії білка цього каналу - 110%. У гостро ізольованих нейронах цієї зони кори Т-струм не виявлений через можливу локалізацію каналів на дистальних дендритах. Для 25-денних щурів WAG/Rij показано зменшення експресії мРНК Cav3.1 та Cav3.2 субодиниць Т-каналів та зниження Т-струмів у нейронах латеродорзального ядра таламусу на 43% порівняно з контрольними щурами.Визначено мікро-РНК rno-mir-1 як потенційний регулятор трансляції мРНКнизькопорогового кальцієвого каналуCav3.2 у таламусі та корі головного мозку.