Шевченко Ю. І. Роль WaaL лігаз в реалізації біологічних властивостей ліпополісахаридів Yersinia enterocolitica

Показано, що позбавлені лігаз WaaL ієрсинії утворюють відмінні від дикого типу профілі ліпополісахаридів. Ймовірно, завдяки низькій субстратній специфічності WaaLOS лігаза здатна компенсувати відсутність WaaLРS у випадку делеції гену waaLPS. Запропоновано ефективну систему синтезу препаративної кількості WaaLOS лігази. Проведено клонування ЛПС-лігази бактерій Y. enterocolitica в експресуючий вектор pTTQ18, підбірано оптимальні умови для синтезу функціональних рекомбінантних білків та їх ефективного виділення методом афінної хроматографії. Функціональна активність клонованої лігази WaaLOS була продемонстрована in vivo з використанням waaL-нокаутного штамуE. coli CLM24. Встановлено участь лігаз у формуванні бактеріальної резистентності до білків системи комплементу, рухливості та стресостійкості бактерій. Найбільш чутливими до дії стресових факторів виявилися бактерії Y. enterocolitica 6471/76 (О:3), позбавлені лігаз WaaLOS та WaaLРS. Для всіх waaL-мутантів була характерна здатність до відновлення рухливості після комплементації функціональним геном втраченої лігази.