Сторож Л. А. Біотехнологія функціональних фосфопептидів з білків казеїнового комплексу коров`ячого молока

У дисертаційній роботі науково обґрунтовано та розроблено технологію виробництва біологічно активних фосфопептидів з протеїнів казеїнового комплексу коров’ячого молока. Як субстрати було виділено ряд фосфопротеїнів з коров’ячого молока в умовах, які мінімально впливають на їх структуру і хімічний склад. Було отримано два препарати загального казеїну (ізоелектричним осадженням і осадженням у системі «вода – білки молока – пектин»). Шляхом ексклюзивної хроматографії виділено фосфопротеїн β-CN-5P, а диференційним осадженням в комбінації із специфічним протеолізом рекомбінантним хімозином – суміш фосфопротеїнів, яка включає фракції αS1-СN-ХР і αS2-СN-ХР. Для обґрунтовання способу протеолітичного розщеплення фосфопротеїнових попередників було використано протеолітичні препарати: папаїн, трипсин, хімотрипсин, нейтральну протеазу. Отримані результати свідчать про доцільність використання як субстрату загального препарату фосфопротеїнів молока та протеолітичного препарату панкреатину для отримання природних біоактивних фосфопептидів. Було досліджено вплив на вихід фосфопептидів значення фермент-субстратного співвідношення, рН і температури. В результаті було запропоновано умови, які забезпечують високий вихід, а також утворення природних біологічно активних фосфопептидів (рН 7,9; 37оС; співвідношення «фермент:субстрат» – від 1:100 до 1:140). На основі проведених досліджень розроблено технологічну схему виробництва біологічно активних фосфопептидів, проведено її апробацію у промислових умовах. Отриманий препарат біоактивних фосфопептидів охарактеризовано за молекулярно-масовим розподілом. Встановлено, що більше 52 % фосфопептидів мають молекулярну масу 700-1500 Да. Експериментально встановлено, що виділені фосфопептиди здатні гальмувати ріст ракових клітин: людської гліобластоми U373 та людської аденокарциноми HeLa.