Васильєв Р. Г. Морфофункціональні властивості постнатальних мультипотентних стовбурових клітин-похідних нервового гребня з волосяного фолікула та біотехнологічні аспекти їх використання у регенеративній медицині

У дисертаційній роботі представлені результати наукових досліджень морфофункціональних властивостей постнатальних мультипотентних стовбурових клітин-похідних нервового гребня (мСК-ПНГ) з вібрисів миші та волосяного фолікула людини, розроблені деякі аспекти їх використання у регенеративній медицині. У роботі ідентифіковані нові маркери постнатальних мСК-ПНГ з волосяного фолікула – транскрипційний фактор Sox2 та мембранний рецептор CD349 (Frizzled-9). Вперше показана ієрархічна організація культури мСК-ПНГ, що представлена КУО різних типів, та наявність субпопуляції ALDHbright клітин. Досліджено вплив різних чинників (bFGF, EGF, щільність посіву, вміст кисню у складі газової фази) на проліферацію постнатальних мСК-ПНГ. Встановлено, що bFGF та EGF мають дозозалежний мітогенний ефект, який більш виражений у bFGF. Виявлено, що низька щільність посіву та знижена концентрація кисню (5 % та 10 %) є кращими для культивування постнатальних мСК-ПНГ. Показано, що постнатальні мСК-ПНГ мають здатність до самовідновлення та до спрямованої мультилінійної диференціації у нейрони, глію (Шваннівські клітини), адипоцити, остеобласти та хондроцити. Досліджено життєздатність і проліферативну активність постнатальних мСК-ПНГ при культивуванні у складі фібринового та колагенового 3D гідрогелів. Розроблено метод створення тканинно-інженерного біомедичного продукту на основі постнатальних мСК-ПНГ, фібринового гідрогелю й остеопластичних матеріалів. Терапевтичний потенціал постнатальних мСК-ПНГ був оцінений на моделях критичного дефекту кісток склепіння, пошкодження периферичного нерва та короткочасної киснево-глюкозної депривації органотипової культури гіпокампу. Встановлено, що постнатальні мСК-ПНГ стимулюють репаративну регенерацію кісток склепіння та периферичного нерва, а також сприяють виживанню нейронів зони СА1 гіпокампу. Також розроблено метод великомасштабної експансії постнатальних мСК-ПНГ людини зі збереженням їх морфофункціональних властивостей з метою створення біомедичних клітинних і тканинно-інженерних продуктів для регенеративної медицини.