Коротаєва Н. В. Розробка біопрепарату на основі молочнокислих бактерій проти збудника бактеріального раку рослин

Дисертаційну роботу присвячено вивченню ендофітної мікробіоти судин та тканин пухлин винограду, збудника бактеріального раку, пошуку його активних антагоністів серед молочнокислих бактерій та створенню на їх основі біопрепарату проти збудника бактеріального раку рослин. Встановлено чисельність та видовий склад ендофітної мікробіоти судин винограду, середню чисельність представників мікробіоти та бактерій роду Rhizobium у пухлинах винограду. ПЛРаналіз генів патогенності показав, що у пухлинах рослин переважають авірулентні бактерії R. vitis і R. radiobacter. Було ізольовано та ідентифіковано штами патогенних ризобій R. vitis ONU388, R. vitis ONU389 та R. vitis ONU390. З метою пошуку штамів антагоністів проти збудників бактеріального раку винограду серед штамів Lactobacillus plantarum ПЛР-дослідження показало, що усі досліджені штами L. plantarum містять від 2 до 6 генів, відповідальних за синтез плантарицинів, що вказує на рівень їх антагоністичного потенціалу. Дослідження антагоністичної активності лактобацил in vitro проти збудників бактеріального раку рослин показало, що у 100% випадків ризобії пригнічувалися внаслідок утворення органічних кислот досліджених штамів (pH 3,5-4,0) та лише бактерії L. plantarum ONU87 є продуцентом бактеріоцину. Дослідження in vivo на моделі дисків моркви у випадку обробки ризобіями з бактеріями досліджуваних штамів L. plantarum показало, що серед семи протестованих штамів L. plantarum найкращі результати пригнічення росту пухлин показали шість штамів лактобацил, що свідчить про високу антагоністичну активність цих лактобактерій відносно ризобій. За ступенем антагоністичної активності, пригнічення утворення, росту пухлин і спектром генів, що відповідають за синтез бактеріоцинів, для подальших досліджень було відібрано перспективний штам L. plantarum ONU87. Методом математичного аналізу з використанням неповної регресійної моделі розроблено оптимальне поживне середовище, що дає можливість отримати концентрацію життєздатних клітин бактерій 1,16х1010 КУО/мл. Розроблено технологічну схему отримання біопрепарату та рекомендації стосовно умов та термінів зберігання біопрепарату. Встановлено, що обробка бактеріями L. plantarum ONU87 рідкої форми біопрепарату за штучного інфікування чубуків винограду R. radiobacter C58 призводила до зменшення на 76,8% кількості заражених зразків, в які потрапив збудник бактеріального раку та стимулювала ріст і розвиток рослин винограду.