Василишин Р. В. Конструювання поліпшених продуцентів етанолу та глутатіону у дріжджів Оgataea polymorpha

Дисертація присвячена отриманню штамів дріжджів О. polymorpha з підвищеним рівнем продукції етанолу з ксилози та штамів з підвищеним вмістом внутрішньоклітинного глутатіону. З метою підвищення питомої швидкості поглинання ксилози та зниження спорідненості до глюкози, вперше було створено модифіковану форму транспортера Hxt1 O. polymorpha шляхом заміни аспарагіну на аланін в положенні 358. Крім того, залишки лізину на N-кінці Hxt1, що є потенційними сайтами убіквітинування, було замінено на залишки аргініну для запобігання швидкої деградації транспортера. Здійснено посилення експресії генів, що кодують пероксисомні ферменти транскетолазу Das1 (дигідроксиацетонсинтаза) та трансальдолазу Tal2 в геномі рекомбінантного штаму О. рolymorpha з покращеними параметрами алкогольної ферментації ксилози. Встановлено, що внаслідок посилення експресії генів DAS1 і TAL2 продукція етанолу з ксилози зростає на 30%. Завдяки додатковому посиленню експресії гена MET4 в попередньо сконструйованому штамі із посиленою експресією гена GSH2, вдалося підвищити вміст внутрішньоклітинного глутатіону в штамах O. polymorpha в 5 разів порівняно із штамом дикого типу. Отримані результати свідчать про залучення транскрипційного фактора Met4 в регуляцію біосинтезу глутатіону у дріжджів O. polymorpha.