Бузіашвілі А. Ю. Отримання генетично модифікованих рослин родини Solanaceae з геном лактоферину людини для підвищення їх стійкості до фітопатогенів

В дисертаційній роботі показано перспективність застосування генетичної трансформації рослин томатів та картоплі геном лактоферина людини (hLf) для під-вищення їх стійкості до бактеріальних (Ralstonia solanacearum, Clavibacter michi-ganensis) та грибних (Phytophthora infestans, Fusarium sambucinum – у випадку кар-топлі) фітопатогенів. Трансформацію томатів сортів Money Maker та Лагідний, кар-топлі сортів Вернісаж, Світанок Київський, Левада та Зарево проводили Agrobacterium-опосередкованим методом за використання штаму A. tumefaciens EHA105, який ніс плазмідний вектор pBin35Lf, що містив ген hLf під контролем 35 S промотора віруса мозаїки цвітної капусти (CaMV35S), а також ген nptII, що забезпе-чує стійкість до канаміцина. Селекцію трансгенних ліній томатів та картоплі прово-дили на живильному середовищі в присутності 100 мг/л канаміцина. Інтеграцію гена hLf підтверджували за допомогою ПЛР-аналізу із використанням праймерів, специ-фічних до даного гена. Експресію лактоферина людини в трансгенних лініях підтверджували за допомогою Вестерн блот аналізу із використанням специфічних моноклональних антитіл проти лактоферину. За допомогою біотесту «дифузії в агар» було показано, що зразки трансгенних рослин, які експресували лактоферин, інгібують ріст бактерій та грибів. В результаті біотестів, які проводили шляхом за-раження трансгенних рослин томатів та картоплі конідіями P. infestans, картоплі – F. sambucinum, було встановлено підвищення стійкості трансгенних ліній до фітофторозу з 1 до 7 балів, до фузаріозу – з 2 до 7 балів за 9-бальною шкалою. Ре-зультати даної роботи вказують на перспективність трансформації цінних сортів то-матів та картоплі геном лактоферину людини для підвищення їх стійкості до фітопа-тогенів бактеріальної та грибної природи.