Сукач О. М. Низькотемпературне консервування нейральних клітин-попередників у складі багатоклітинних агрегатів.

English version

Дисертація на здобуття ступеня доктора наук

Державний реєстраційний номер

0517U000021

Здобувач

Спеціальність

  • 03.00.19 - Кріобіологія

27-12-2016

Спеціалізована вчена рада

Д 64.242.01

Інститут проблем кріобіології і кріомедицини НАН України

Анотація

Об'єкт дослідження - культивування нейральних клітин до і після кріоконсервування та гіпотермічного зберігання. Мета - встановити умови утворення багатоклітинних агрегатів ізольованими клітинами головного мозку людини і щурів в культурі, дослідити вплив їх формування на біологічні властивості нейральних клітин-попередників після кріоконсервування та гіпотермічного зберігання, вивчити ефективність трансплантації нейральних клітин-попередників у складі агрегатів щурам з травматичним пошкодженням спинного мозку. Методи дослідження: виділення клітин, культивування, кріоконсервування, світлова та флуоресцентна мікроскопія, морфометричний аналіз, імуноцитохімія, спектрофотометрія, біохімічні методи, методи статистичного аналізу. Вперше визначені головні фактори спонтанного утворення багатоклітинних агрегатів у процесі культивування гетерогенної суспензії ізольованих нейральних клітин. Отримані оригінальні дані, які показують, що в агрегатах створюються сприятливі умови для проліферації та диференціювання нейральних клітин-попередників за відсутності екзогенних факторів росту, цитокінів і гормонів. Вперше показано, що у складі агрегатів нейральні клітини-попередники зберігають здатність до проліферації та диференціювання при більш тривалих термінах гіпотермічного зберігання, ніж у складі суспензій. Вперше продемонстровано, що в складі агрегатів ізольовані нейральні клітини-попередники мають більш високу кріостійкість, ніж у складі суспензій. На експериментальній моделі травми спинного мозку у щурів вперше показано, що трансплантація кріоконсервованих нейральних клітин-попередників у складі агрегатів чинить більш виражену позитивну дію на відновлення рухливості задніх кінцівок щурів порівняно з суспензією. Результати роботи можуть бути використані при розробці нових і вдосконаленні існуючих протоколів культивування, низькотемпературного зберігання, а також селекції ізольованих життєздатних нейральних клітин-попередників.

Файли

Схожі дисертації