Ястребова О. В. Позаклітинна фруктозо-1,6-бісфосфатаза Bacillus subtilis 668

Дисертація присвячена виділенню та дослідженню властивостей позаклітинної фруктозо-1,6-бісфосфатази (ФБФази) Bacillus subtilis 668. Розроблено спосіб очищення цього ферменту. Встановлено вплив джерел вуглецю і температури на динаміку накопичення і активність ферменту. Здійснена очистка у 165 разів до гомогенного стану та отримано ферментний препарат позаклітинної ФБФази з активністю 52,9 од/мг білку. Досліджені фізико-хімічні та молекулярні властивості, кінетичні параметри взаємодії позаклітинної ФБФази з субстратом з метою класифікувати фермент. Встановлено, що позаклітинна ФБФаза B. subtilis 668 відноситься до "лужних" фосфатаз, активність якої залежить від двохвалентних катіонів металів та регулюється АМФ і ФЕП. Позаклітинна ФБФаза - тетраметр, з молекулярною масою субодиниці 630000 Да. Чутливість ФБФази В. subtilis 668 до дії АМФ, ФЕП, двовалентних і моновалентних катіонів, розміру субодиниці та інших факторів дали підставу віднести її до ІІІ класу ФБФаз. Встановлено серологічну спорідненість міжпозаклітинними ФБФазами В. subtilis 668 та молікута Achоlерlasma laidlawii var. granulum шт. 118, що підтверджує філогенетичні зв’язки цих мікроорганізмів. Показано, що позаклітинна і клітинна ФБФази B. subtilis 668 серологічно ідентичні. Виявлено цитотоксичну активність in vitro позаклітинної ФБФази B. subtilis 668 відносно пухлинних клітин саркоми 37. Даний ферментний препарат знімає пухлиноасоційовані антигени з поверні клітини.