Оверченко В. В. Молекулярна діагностика латентного вірусу та SSR-ПЛР ідентифікація сортів хмелю (Humulus lupulus L.) української селекції

Дисертаційна робота присвячена дослідженню латентного вірусу хмелю та створення сучасної ефективної тест-системи для ідентифікації даного вірусу методом ЗТ ПЛР, а також можливості застосування мікросателітних маркерів для генетичної диференціації генотипів хмелю звичайного (Humulus lupulus L.). Проведено дослідження з вивчення біологічних властивостей українського ізоляту латентного вірусу хмелю з подальшим виділенням, очищенням та концентруванням, а також отримані електронно-мікроскопічні дані по цьому вірусу. На основі отриманих позитивних контролів із використанням світової бази даних генетичних послідовностей (GenBank) було розроблено універсальні ПЛР тест-системи, які спрямовані на виявлення та діагностику латентного вірусу хмелю. Створені ПЛР тест-системи дозволили провести скринінг новітніх сортів хмелю української селекції та ідентифікувати досліджуваний вірус. На підставі визначених нуклеотидних послідовностей розроблено систему діагностики, що базується на застосуванні ЗТ-ПЛР з використанням власне синтезованих маркерів. Розроблено методику ідентифікації та диференціації генотипів хмелю української селекції, з використанням SSR-ПЛР. Для розробки молекулярної тест-системи було проведено генетичний аналіз 13 сортів хмелю української селекції, а також підібрано й проаналізовано 10 мікросателітних локусів та синтезовано SSR-праймери. Проведено уніфікацію ПЛР та адаптовано до українських генотипів хмелю. На основі отриманих даних створено комп'ютерний "генетичний" банк даних та побудовано філогенетичні зв'язки між даними сортами хмелю.