Климишин Д. О. Система клонування генів у штамі - продуценті ногаламіцину Streptomyces nogalater IMET43360

За допомогою кон'югації з E. coli ET12567 (pUB307) розроблено ефективний метод перенесення автономних та інтегративних плазмідних ДНК в клітини S. nogalater IMET43360. Досліджено характер інтеграції плазмід у хромосому S. nogalater IMET43360, їхній вплив на рівень синтезу ногаламіцину та стабільність успадкування транскон'югантами. Використовуючи розроблений метод для вивчення біосинтезу ногаламіцину, досліджено деякі аспекти його регуляції у S. nogalater IMET43360. У досліджуваному штамі клоновано ген snorA та проведено його спрямовану інактивацію. Мутанти з "нокаутом" цього гена у хромосомі S. nogalater характеризуються повною відсутністю продукції ногаламіцину та його попередників. Уперше було здійснено успішну надекспресію гена snorA, що кодує позитивний регулятор біосинтезу ногаламіцину у клітинах S. nogalater дикого типу. Сконструйовані на основі цього підходу штами характеризуються підвищеним рівнем синтезу ногаламіцину. Експресія гена snogM, під контролем конститутивного промотора гена резистентності до еритроміцину у складі плазміди pKEM1 у клітинах S. echinatus DSM40730, призводить до продукції ним нової сполуки, ідентифікованої методом ТШХ.