Бараш О. О. Оцінка якості сперматозоїдів за морфологічними та функціональними особливостями при екстракорпоральному заплідненні

Об'єкт: еякулят, сперматозоїди, ембріони 2-6 доби розвитку. Мета: Розробити систему морфофункціональної оцінки якості сперматозоїдів у чоловіків з важкими формами порушень сперматогенезу для використання відібраних статевих клітин у екстракорпоральному заплідненні. Методи: культуральні, цитологічні, молекулярно-біологічні, цитогенетичні, статистичні. Результати: У роботі проведено аналіз ефективності застосування морфофункціонального добору сперматозоїдів у чоловіків з важкими вадами сперматогенезу при екстракорпоральному заплідненні. Виявлені особливості морфофункціональних характеристик сперматозоїдів впливають на ефективність екстракорпорального запліднення та розвиток ембріонів in vitro і можуть бути використані при формуванні стратегії подолання безпліддя у чоловіків. Розраховано коефіцієнти кореляції між оцінкою сперматозоїдів за критеріями Крюгера та прижиттєвою оцінкою за морфофункціональними критеріями при збільшенні х 6300. Встановлено, що розвиток ембріонів до стадії бластоцисти in vitro негативно корелює зі специфічними аномаліями голівки сперматозоїда. Добір сперматозоїдів за морфофункціональними ознаками при збільшенні х 6300 дозволяє підвищити частоту формування бластоцист. Виявлено, що застосування добору сперматозоїдів за морфофункціональними критеріями є найбільш ефективним при тератозоосперміях і олігозоосперміях. Проаналізовано можливість застосування гіалуронового гідрогелю для відбору зрілих сперматозоїдів у екстракорпоральному заплідненні. Встановлено, що добір сперматозоїдів за морфофункціональними критеріями сприяє формуванню ембріонів високої якості з нормальним каріотипом. Разом з тим, отримані результати є підґрунтям для розробки нових методів оцінки гамет, що будуть сприяти зменшенню імовірності використання гамет з генетичними вадами для запліднення in vitro. Новизна: Вперше охарактеризовано морфологічні особливості будови сперматозоїдів у чоловіків з важкими вадами сперматогенезу з використанням диференційної інтерференційно - контрастної мікроскопії при збільшенні х 6300. Виявлено прямий зв'язок між кількістю нормальних сперматозоїдів, результатами запліднення in vitro та подальшим розвитком ембріонів in vitro. Визначено, при яких вадах сперматогенезу використання добору сперматозоїдів за морфофункціональними характеристиками є найбільш доцільним. Доведено покращення ефективності культивування ембріонів in vitro при застосуванні гіалуронового гідрогелю та добору сперматозоїдів за морфофункціональними характеристиками, виявленими при збільшенні х 6300. Розроблено методичну систему мікроманіпуляцій, аналізу та добору сперматозоїдів при збільшенні х 6300. Показана можливість застосування добору сперматозоїдів за морфофункціональними характеристиками для лікування чоловіків з підвищеним рівнем анеуплоїдій у статевих клітинах. Упровадження: Результати розробок автора упроваджено у практику в Клініці репродуктивної медицини "Надія". Сфера використання: цитологія, клітинна біологія, медицина.