Іванова Т. В. Діагностика та молекулярно-біологічна ідентифікація міковірусу MVX печериці двоспорової (Agaricus bisporus) (J. Lge) Imbach) в закритому ґрунті

Дисертаційну роботу присвячено вивченню вірусних хвороб, удосконаленню методики виділення длРНК з плодових тіл грибів печериці двоспорової (Agaricus bisporus (J. Lge) Imbach)) та розробці молекулярно-біологічних тест-систем на міковіруси в закритому ґрунті. Проведено первинний скринінг зразків печериці в умовах закритого ґрунту на предмет інфікування вірусами методами візуальної діагностики плодових тіл і міцелію та електронної мікроскопії. Показано поширеність міковірусу MVX печериці в умовах господарств Київської області. Виділено, очищено та ідентифіковано вірусні дволанцюгові РНК (длРНК) з культури грибів. Уперше методом екстракції і очищення длРНК виявлено та ідентифіковано геномну дволанцюгову РНК, яку віднесено до MVX міковірусу печериць. Оптимізовано умови проведення ПЛР для діагностики та ідентифікації MVX. Уперше розроблено власну діагностичну мультиплексну ПЛР тест-систему для виявлення високопатогенного міковірусу MVX (Mushroom Virus X). Запропоновано якісний склад субстратів і живильних середовищ для культивування печериці двоспорової в умовах закритого ґрунту, що дало можливість удосконалити біотехнологію виробництва міцелію у промисловому виробництві печериці двоспорової на безвірусній основі. У результаті проведених досліджень рекомендовано здійснювати обов'язковий контроль посівного (маточного) матеріалу грибів (міцелію) на присутність вірусних патогенів, які можуть знаходитись у латентній (безсимптомній) формі. Останнє стати прихованою причиною виникнення змішаних інфекцій, коли за умов інфікування вірусом грибні культури стають чутливими до хвороб, спричинених бактеріями і іншими патогенами, призводячи до втрат врожайності та якості продукції. Апробована система діагностики й ідентифікації длРНК-фрагментів, яка дозволяє проводити лабораторну експрес-діагностику на MVX вірусу печериці двоспорової. Ключові слова: печериця двоспорова, вірусна хвороба, електронна мікроскопія, ідентифікація, длРНК, мультиплексна ПЛР, молекулярна діагностика.