Присяжнюк Л. М. Особливості прояву та способи оцінки генетичних конструкцій в трансгенних рослин цукрових буряків

Об'єкт дослідження особливості організації та прояву трансгенів у рослинах цукрових буряків. Мета досліджень - встановлення особливостей прояву та способів оцінки генетичних конструкцій у трансгенних рослинах цукрових буряків, дослідження шляхів їх стабільного прояву в компонентах і гібридах та розроблення системи діагностики та оцінки експресії трансгенів у геномі цукрових буряків. Методи досліджень - загальноприйняті. У дисертаційній роботі викладено результати досліджень із розроблення методу оцінки активності генів за допомогою полімеразної ланцюгової реакції в поєднанні із зворотною транскрипцією, а також мультиплексний метод ПЛР для ідентифікації послідовностей 35S промотора, генів EPSPs та als в рослинах цукрових буряків, толерантних до дії гліфосату. Обґрунтовано доцільність застосування екстракції сумарної РНК на основі гуанідинтіоціонату та фенолу з температурою інкубації на етапі лізису +60°С, а також Oligo(dT)-праймерів для проведення реакції зворотної транскрипції з метою визначення активності гена EPSPs. Встановлено тісну залежність гена інтересу та промоторної послідовності за їх виявлення в геномі цукрових буряків та залежність активності гена інтересу від наявності послідовності 35S промотору та гена EPSPs. Показано, що з метою добору селекційного матеріалу толерантного до дії гліфосату, доцільно першочергово визначати регуляторні послідовності та ген інтересу з подальшим визначенням його активності. За результатами досліджень розроблені методичні рекомендації та впроваджені у навчальний процес Національного університету біоресурсів та природокористування України для підготовки фахівців зі спеціальностей "Біотехнологія" та "Селекція і генетика сільськогосподарських культур".