Радченко М. М. Отримання штаму-продуценту Bacillus subtilis з підвищеним накопиченням рибофлавіну

Дисертаційна робота присвячена виділенню та селекціонуванню нових штамів-продуцентів рибофлавіну. Метою роботи було виділити культуру роду Bacillus з природних джерел, а саме поверхні овочевих культур, за допомогою методу відбитків, і отримати штам-продуцент з підвищеним накопиченням рибофлавіну. Для пошуку бактерій, що синтезують рибофлавін, було досліджено 9 зразків бульб картоплі сорту Адретта, зібраних на полях в передмісті міста Києва. У результаті з 9 зразків бульб картоплі було виділено 10 культур з забарвленням колоній різного кольору. Методом граничних розведень отримали чисту культуру мікроорганізмів з найбільшим накопиченням рибофлавіну для подальшого встановлення її культурально-морфологічних особливостей. За допомогою філогенетичного аналізу послідовності гена 16S рРНК штаму продуцента було підтверджено, що виділений штам належить до виду B. subtilis. Отриманий штам-продуцент рибофлавіну, внесено до «Колекції штамів мікроорганізмів та ліній рослин для сільськогосподарської та промислової біотехнології» ДУ «Інститут харчової біотехнології та геноміки НАН України» за номером IFBG МК-2 та депоновано в «Національному Депозитарії мікроорганізмів» Інституту мікробіології і вірусології ім. Д.К. Заболотного НАН України за номером ІМВ В-7797. За культивування штаму в колбах об’ємом 1 дм3 та об’ємом ферментаційного середовища 0,250 дм3, накопичення рибофлавіну становило 13,9 г/дм3 на 66-ту год. культивування. За культивування штаму IFBG МК-1А у біореакторі з періодичним підживленням істотно збільшувалось накопичення рибофлавіну (на 65 %) порівняно з накопиченням рибофлавіну в колбах. Штами B. subtilis ІМВ В-7797, IFBG МК-1А і IFBG NTG2 в подальшому пропонуються для використання в промисловій технології рибофлавіну і для створення на їх основі рекомбінантного штаму для надсинтезу рибофлавіну.