Бреус О. С. Функціональні зв'язки КоА-синтази із компонентами сигнальних шляхів клітини

Об'єкт - молекулярні механізми функціонування сигнальних систем клітини та їхній взаємозв'язок із метаболічними процесами. Мета - ідентифікувати функціональні зв'язки між ферментом КоА-синтазою та компонентами сигнальних шляхів клітини. Методи - біоінформатичний аналіз, афінна хроматографія, тимчасова та стабільна трансформація клітин ссавців кДНК конструкціями та кіРНК (коротка інтерференційна РНК), імунопреципітація білків та Вестерн-блот аналіз, конфокальна імунофлуоресцентна мікроскопія, субклітинне фракціонування, тест на здатність клітин до утворення колоній в напіврідкій агарозі та ін. Результати та новизна - Ідентифіковано нову ізоформу КоА-синтази. Ідентифіковано сигнальні білки, що утворюють комплекси із КоА- синтазою в клітинах ссавців, - тирозин фосфатазу Shp2 та регуляторну субодиницю PI3K, p85. Вперше показано, що фракція КоА-синтази у клітинах ссавців зазнає фосфорилування по тирозину і таке фосфорилювання може впливати на її ФПАТ активність. Показано, що рівень експресії КоА-синтази впливає на активність PI3K-залежного сигнального шляху та активність тирозинових кіназ. Вперше продемонстровано, що рівень експресії КоА-синтази впливає на фенотипічні прояви злоякісної трансформації клітини, а саме незалежний від контактів із позаклітинним матриксом ріст та виживання за умов відсутності ростових факторів у культурі in vitro.