Дергай М. В. Ідентифікація та характеристика ізоформ адаптерного білка інтерсектину 1

Об'єкт дослідження - регуляція функціонального різноманіття ізоформ адаптерних білків. Предмет дослідження - транскрипційні та білкові ізоформи адаптерного білку ITSN1. Методи дослідження - клонування фрагментів кДНК, афінна хроматографія, ЗТ-ПЛР на одиничних клітинах, тимчасова трансфекція клітин еукаріот, Вестерн-блот та Саузерн-блот аналізи, імунопреципітація, преципітація білкових комплексів за допомогою GST-злитих білків, сайт-спрямований мутагенез, комп'ютерне моделювання третинної структури білків, конфокальна флуоресцентна мікроскопія. Результати та новизна - у роботі ідентифіковано групу транскрипційних ізоформ, що містять новий, альтернативний екзон 22а. Доліджено структуру транскриптівта їх експресія. Виявлено білковий продукт ізоформи ITSN1-22a. Ця ізоформа колокалізується з основною ізоформою ITSN1-s та утворює з нею білковий комплекс. Ізоформа ITSN1-22a має специфічні між- та внутрішньомолекулярні взаємодії. В роботі охарактеризовано транскрипти, що містять екзон 20. Включення цього екзону є нейрон-специфічним, такі транскрипти є властиві лише хордовим організмам. Інсерція, яку кодує екзон 20, змінює специфічність зв'язування SH3A-домену інтерсектину 1. Було показано, що ця зміна убомовлена перебудовами в третій кишені інтерфейсу взаємодії домену. Подібний механізм було встановлено для нейрон-специфічної форми кінази Src1.