Арешков П. О. CHI3L1 і CHI3L2 як антагоністичні ефектори життєздатності клітин та активатори сигнальних каскадів

Робота присвячена характеристиці та порівнянню онкогенних властивостей гомологічних гліома-асоційованих генів хітиназа-3-подібного білку 1 (CHI3L1) і хітиназа-3-подібного білку 2 (CHI3L2) та визначенню впливу CHI3L2 і CHI3L1 на життєздатність клітин та активацію сигнальних каскадів МАРК і РІ3К. Показано, що на противагу до мітогену CHI3L1, додавання рекомбінантного CHI3L2 до середовища клітин 293 та U-251 призводить до пригнічення їх життєздатності за умов безсироваткового культивування. Інгібуючий вплив білка CHI3L2 опосередковується довгостроковим фосфорилюванням ERK1/2, тоді як додавання глікопротеїну CHI3L1 призводить до нетривалої активації цих кіназ. Аналіз локалізації фосфо-ERK1/2 після додавання хітиназоподібних білків до клітин обох типів вказує на клітинну специфічність даного процесу. Імунофлуоресцентна мікроскопія показала, що у випадку додавання як CHI3L2, так і CHI3L1 до клітин 293 активація каскаду МАРК характеризувалася ядерною акумуляцією фософорильованих ERK1/2, тоді як в клітинах U-251 присутність хітиназоподібних білків в середовищі мала наслідком детекцію активованих форм кіназ переважно в цитоплазмі. Показано, що CHI3L1-індуковане фосфорилювання ERK1/2 вимагає формування клатрин-облямованих сигнальних везикул, тоді як для CHI3L2- індукованого фосфорилювання цих протеїнкіназ достатньо проходження перших двох етапів ендозитозу (кластеризація рецепторних молекул та формування клатрин-облямованої кишені). Встановлено, що лентивірус-опосередкована трансдукція як кДНК CHI3L2, так і кДНК CHI3L1, призводить до набуття клітинами лінії 293 рис злоякісної трансформації (підвищена життєздатність та здатність до субстрат-незалежного росту в м'якому агарі). Проте, на відміну від CHI3L1-продукуючих клітин 293, ектопічна продукція CHI3L2 не призводить до посилення життєздатності клітин за умов культивування без сироватки. Здатність мати як онкогенні, так і онкосупресорні ознаки залежно від умов навколишнього середовища дозволяє визначити CHI3L2 як ген з функціонально-дуалістичними властивостями. Ключові слова: CHI3L1, CHI3L2, злоякісна трансформація, життєздатність клітин, активація сигнальних каскадів.