Блаженко О. В. Роль генів початкових етапів метаболізму глутатіону у захисті від стресу у метилотрофних дріжджів Hаnsenula polymorpha

Дисертаційна робота присвячена вивченню початкових етапів метаболізму глутатіону (GSH) та механізмів захисту від електрофільного і кадмієвого стресу у метилотрофних дріжджів H. polymorpha. За допомогою методів генетичної інженерії ідентифіковано гени GSH1/МЕТ1 і GGT1 H. polymorpha, що кодують S-аденозил-L-метіонін уропорфіриноген (ІІІ) трансметилазу та гамма-глутамілтрансферазу (GGT), відповідно. З'ясовано, що активність HpGsh1р/Met1p є необхідною для синтезу попередника біосинтезу GSH, цистеїну. Із застосуванням фізіолого-біохімічних методів вперше у дріжджів показано, що GGT залучена у деградації кон'югатів GSH з електрофільними ксенобіотиками, однак не ініціює утилізацію GSH як екзогенного джерела сірки у H. polymorpha. Використовуючи ВЕРХ аналіз показано, що H. polymorpha не синтезує фітохелатини, але містять GSH, як основний хелатор іонів кадмію. Іони кадмію спричинюють лише незначні зміни в експресії гена GSH2 H. polymorpha, що кодує перший фермент біосинтезу GSH, гамма-глутамілцистеїнсинтетазу. На основі результатів атомного абсорбційного аналізу висловлено припущення, що поглинання іонів кадмію у H. polymorpha регулюється Cd-GSH комплексом, а гени GSH1/MET1 і МЕТ4 залучені у дозрівання, тоді як ген GGT1 - у метаболізм клітинного Cd-GSH комплексу. Запропоновано гіпотетичну схему детоксикації кадмію та електрофільних ксенобіотиків у метилотрофних дріжджів H. polymorpha.