Куклін А. В. Експресія генів вродженого імунітету в інтактних гепатоцитах та печінці щура під час її регенерації

Досліджено експресію генів системи вродженого імунітету в первинних гепатоцитах під впливом IFN-альфа та в печінці щура під час її регенерації та реакції гострої фази, ініційованих відповідно частковою гепатектомією та лапаротомією. Рівень мРНК Ifn альфа в непаренхімних клітинах печінки зростав при відновлювальному процесі після часткової гепатектомії і стрімко знижувався після лапаротомії. З метою визначення ролі IFN-альфа у відновленні печінки після часткової гепатектомії досліджено як змінюється транскриптом первинних гепатоцитів, культивованих з IFN-альфа в концентрації, яку було визначено раніше в печінці після часткової гепатектомії. Гени, які індукуються IFN-альфа в первинних гепатоцитах щура за умов, максимально наближених до ситуації в печінці, яка регенерує, кодують як про-, так і протизапальні білки, про- і протиапоптичні фактори, активатори і інгібітори транскрипції, що вказує на збалансовану відповідь гепатоцитів на дію цитокіна за цих умов на відміну від токсичної більш тривалої дії IFN-альфа в більш високій концентрації. Гени системи ІСГілування реагують найскоріше за інших диференційно-експресованих генів на дію IFN?. Біоінформатичним методом показано, що дія IFN-альфа реалізується переважно через внутрішньоклітинний сигнальний шлях Jak/STAT/ISGF3. Показано, що після часткової гепатектомії і лапаротомії, експресія "інтерферон-регульованих генів" системи ІСГілування (Ube1l, Ube2l6, Usp18, Isg15) і гена Irf7 не асоціюється з експресією гена Ifn-альфа на відміну від "інтерферон-регульованого гена" Pkr, експресія якого асоціюється із експресією Ifn-альфа. Біоінформатичним методам визначено сайти зв'язування транскрипційних факторів в промоторах генів системи ІСГілування й показано, що їх експресія може регулюватися транскрипційним фактором IRF3 і не залежати від дії IFN-альфа. Запропоновано послідовність регуляторних подій, що ведуть до IFN-альфа-залежної регуляції експресії гена Pkr під час регенерації печінки та IFN-альфа-незалежної регуляції генів системи ІСГілування під час реакції гострої фази. Продемонстровано якісну різницю між відповіддю клітин печінки на часткову гепатектомію та лапаротомію, що полягає у створенні передумов для посилення транскрипції і трансляції під час відновлення печінки та інтенсифікації модифікації білків шляхом ІСГілування під час реакції гострої фази.